【摘 要】
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目的 研发鹿胎DNA阳性质控品,组装检测试剂盒.方法 提取鹿胎及其伪品DNA,设计通用鹿引物并进行PCR扩增,克隆种属特异性目的片段,构建鹿胎DNA阳性质控品并组装DNA检测试剂盒,
【机 构】
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北华大学医学技术学院,吉林吉林132013;北华大学医学技术学院,吉林吉林132013;吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心,吉林吉林132013
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目的 研发鹿胎DNA阳性质控品,组装检测试剂盒.方法 提取鹿胎及其伪品DNA,设计通用鹿引物并进行PCR扩增,克隆种属特异性目的片段,构建鹿胎DNA阳性质控品并组装DNA检测试剂盒,进行试剂盒性能实验并应用于市售鹿胎样品检测.结果 应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)分析测序比对结果,正确率为100％,在526 bp处可见明显条带,与目的片段相符,可作为鹿胎阳性质控品.阳性质控品灵敏性最低检测限为10 ng· μL-1,经多次反复冻融的试剂盒,仍可确保PCR检测结果的稳定性.试剂盒应用于对市售鹿胎及伪品的检测,PCR检测结果与预期相符.结论 构建鹿胎阳性质控品作为电泳分析时的阳性对照,结果更加准确稳定,适用于对鹿胎及伪品的快速鉴定,保障对鹿胎质量的有效监管.
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