【摘 要】
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目的比较不同亚型抗体免疫毒素(IT)体外去除脐血T细胞的效率及其对髓系和淋巴系造血祖细胞增殖反应的影响.方法 (1)间接免疫荧光法测定脐血、外周血及富集干细胞的正常供者外
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的比较不同亚型抗体免疫毒素(IT)体外去除脐血T细胞的效率及其对髓系和淋巴系造血祖细胞增殖反应的影响.方法 (1)间接免疫荧光法测定脐血、外周血及富集干细胞的正常供者外周血中CD+2 、CD+3、CD+4、CD+5、CD+7、CD+8 T亚群细胞的含量;(2)直接免疫荧光法测定脐血CD-3CD+5T亚群细胞含量;(3)噻唑蓝(MTT)比色法分别观察三组抗人白细胞分化抗原的单克隆抗体(CD+2、CD+4、CD+7)与完整蓖麻毒素(ricin)耦联制备的三组免疫毒素(CD2ricin、CD4ricin、CD7ricin)对脐血T淋巴细胞转化功能的影响;(4)用造血祖细胞培养的方法分别观察三组免疫毒素对脐血粒单系造血祖细胞(CFU-GM)和T淋巴系祖细胞(CFU-TL)增殖反应的影响.结果 (1)脐血中含有一定比例的CD+2、CD+3、CD+4、CD+5、CD+7、CD+8 T亚群细胞,同时可检测到低比例的CD-3CD+5早期T细胞;(2)CD2ricin在10-10～10-8 mol/L,CD4ricin在10-8～10-7 mol/L,CD7ricin在10-9～10-8 mol/L均能有效抑制脐血T淋巴细胞的转化功能;(3)CD2ricin和CD7ricin在10-10～10-9 mol/L,CD4ricin在10-9～10-7 mol/L范围内对CFU-GM的增殖反应无显著影响;CD2ricin在10-10～10-9 mol/L,CD4ricin在10-8～10-7 mol/L浓度范围内对CFU-TL 的增殖有轻度的抑制作用; CD7ricin在10-10～10-8 mol/L 范围对CFU-TL的增殖有显著的抑制作用,不能作为去除T细胞的免疫毒素;(4)三组免疫毒素对CFU-TL的抑制作用均高于对CFU-GM的抑制作用.结论 CD2ricin、CD4ricin两种免疫毒素在一定浓度范围内可去除不同亚型的T细胞, 并且不影响其造血的恢复,但对免疫功能重建可能会产生一定的影响.
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