绿色荧光蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞及向神经细胞的分化

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:selena2009
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目的 建立能够稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠胚胎干细胞(ESC),并诱导其向神经细胞分化,为临床移植治疗神经系统疾病提供方便追踪观察的神经细胞.方法 分别用脂质体、电穿孔转染法转染小鼠胚胎干细胞系R1,检测48 h转染效率;经G418筛选后,得到稳定高效表达GFP的ESC克隆,通过碱性磷酸酶(AKP)染色检测ESC的生物学特性;利用单层分化法诱导转染GFP的胚胎干细胞向神经细胞分化,通过免疫荧光检测神经细胞特异标记Toil.结果 转染48 h的GFP阳性细胞转染率脂质体组为65%,电穿孔组为79%,两组比较差异无统计学意义(X2=3.14,P0.05).转染GFP的胚胎干细胞AKP染色阳性,并可诱导分化为Tuj1阳性的神经细胞.结论 建立稳定表达GFP基因的胚胎干细胞克隆,获得的转染GFP的胚胎干细胞能够分化为神经细胞。

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