【摘 要】
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为了探讨LncRNA RMST对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及其可能的作用机制,该研究采用H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,随机分组:si-NC+200 μmol/L H2O2组(即培养基中加入200 μmol/L H2O2干预2 h)、si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组、miR-NC+200 μmol/L H2O2组、miR-27a-3p+200 μmol/L H2O2组、anti-miR-NC+si-LncRNA RMST+200 μmo
【机 构】
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福建医科大学附属第二医院心血管内科,泉州362000
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为了探讨LncRNA RMST对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及其可能的作用机制,该研究采用H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,随机分组:si-NC+200 μmol/L H2O2组(即培养基中加入200 μmol/L H2O2干预2 h)、si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组、miR-NC+200 μmol/L H2O2组、miR-27a-3p+200 μmol/L H2O2组、anti-miR-NC+si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组、anti-miR-27a-3p+si-LncRNA RMST+200 μmol/LH2O2组.qRT-PCR法检测 LncRNA RMST 和miR-27a-3p的表达量;利用相应试剂盒检测细胞培养液中LDH的水平,以及细胞内MDA、SOD的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LncRNA RMST和miR-27a-3p的靶向关系;Western blot法检测Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达量.结果显示,与si-NC+200 μmol/LH2O2组比较,si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组中的MDA、LDH的水平、细胞凋亡率以及Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平降低(P＜0.05),SOD的水平升高(P＜0.05);LncRNA RMST可靶向调节miR-27a-3p的表达;与 miR-NC+200 μmol/L H2O2组比较,miR-27a-3p+200 μmol/L H2O2组中的 MDA、LDH的水平、细胞凋亡率以及Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平降低(P＜0.05),SOD的水平升高(P＜0.05);与 anti-miR-NC+si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组比较,anti-miR-27a-3p+si-LncRNA RMST+200 μmol/L H2O2组MDA、LDH的水平、细胞凋亡率以及Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平升高(P＜0.05),SOD的水平降低(P＜0.05).这提示,干扰LncRNA RMST表达可通过靶向miR-27a-3p抑制心肌细胞氧化应激反应及凋亡进而减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤.
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