【摘 要】
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根据GenBank上旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂（KaSPI）基因编码序列设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,将所获PCR产物克隆至pEASY-T1载体后转入克隆感受态Tans5α,经过PCR和EcoR
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31372427）, 教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目（20132325110002）
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根据GenBank上旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂（KaSPI）基因编码序列设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,将所获PCR产物克隆至pEASY-T1载体后转入克隆感受态Tans5α,经过PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定后进行测序。将所获目的基因与载体pET-30a（＋）相连接,然后将鉴定正确的重组表达质粒pET-TsKaSPI转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,利用IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE电泳分析所得融合蛋白大小约为38 000,与预测蛋白理论值大小相符,主要以包涵体形式存在
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