探讨小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响及其机制。
方法分离、培养大鼠VSMC，取对数生长期细胞，利用慢病毒载体感染VSMC，将细胞分为siRNA-EGFR组、siRNA-阴性对照组和空白对照组，5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)法检测各转染组细胞增殖能力，Transwell小室和划痕实验检测各转染组细胞迁移能力，实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各转染组细胞中EGFR、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)基因表达，Western blot法检测各转染组细胞中EGFR、磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化JNK(p-JNK)和磷酸化p38(p-p38)蛋白表达。
结果siRNA-EGFR组VSMC迁移细胞数[(48.5±6.1)个]，均显著低于siRNA-阴性对照组和空白对照组，分别为(86.2±7.2)个和(88.3±7.6)个，差异均有统计学意义(F＝37.261，P＝0.000)，与0 h比较，24 h后，siRNA-EGFR组VSMC迁移率为(35.7±3.8)%，显著低于siRNA-阴性对照组和空白对照组，分别为(74.2±5.7)%和(75.5±6.1)%，差异均有统计学意义(F＝40.315，P＝0.000)；siRNA-EGFR组细胞中ERK、JNK和p38 mRNA相对表达量(0.53±0.09、0.47±0.11、0.41±0.07)均低于siRNA-阴性对照组(0.82±0.12、0.64±0.10、0.68±0.09)和空白对照组(0.85±0.14、0.66±0.13、0.70±0.12)，差异均有统计学意义(F＝15.391、12.817、11.264，P＝0.000、0.000、0.000)；siRNA-EGFR组细胞中p-ERK、p-JNK和p-p38蛋白相对表达量(0.46±0.09、0.38±0.06、0.33±0.06)均低于siRNA-阴性对照组(0.71±0.12、0.57±0.08、0.52±0.07)和空白对照组(0.73±0.13、0.56±0.07、0.54±0.09)，差异均有统计学意义(F＝20.152、14.375、13.843，P＝0.000、0.000、0.000)。
结论特异性抑制EGFR可有效减少VSMC增殖和迁移能力，其机制可能与抑制丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路有关。