【摘 要】
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目的:探讨人16号染色体长臂(16q)缺失相关差异表达基因(DEGs)和miRNAs(DEmiRs)对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡及肝细胞癌(HCC)患者预后的影响及其机制.方法:从肿瘤与癌症基因组图谱(TCGA)数据库的HCC数据集中获取全转录组数据和拷贝数变异(CNV)数据,就16q缺失对数据集进行DEGs和DEmiRs筛选;从Kaplan-Meier Plotter数据库中获取DEGs对患者生存影响图谱;通过miRWalk网站预测DEGs表达调节相关的miRNAs.构建miRNA mimic慢病毒载体转
【机 构】
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广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室,南宁 530021;广西医科大学附属肿瘤医院影像诊断中心,南宁 530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室,南宁 530021;广西医
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目的:探讨人16号染色体长臂(16q)缺失相关差异表达基因(DEGs)和miRNAs(DEmiRs)对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡及肝细胞癌(HCC)患者预后的影响及其机制.方法:从肿瘤与癌症基因组图谱(TCGA)数据库的HCC数据集中获取全转录组数据和拷贝数变异(CNV)数据,就16q缺失对数据集进行DEGs和DEmiRs筛选;从Kaplan-Meier Plotter数据库中获取DEGs对患者生存影响图谱;通过miRWalk网站预测DEGs表达调节相关的miRNAs.构建miRNA mimic慢病毒载体转染Huh7细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测DEmiRs(miR-3145-5p)、DEGs(CYP2E1)的表达,分别采用CCK-8、细胞克隆形成实验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和流式细胞术检测细胞增殖、侵袭、迁移、细胞周期和凋亡.结果:从数据集中筛选出与16q缺失相关的8个miRNAs和12个关键DEGs;根据miRWalk网站预测和分析结果,选择miR-3145-5p与CYP2E1进行后续实验验证.与NC-con294组比较,miR-3145-5p mimic组miR-3145-5p表达和细胞凋亡率升高,CYP2E1蛋白表达水平降低,细胞增殖和侵袭能力增强(均P0.05).结论:16q缺失可能通过上调miR-3145-5p靶向下调CYP2E1表达来促进HCC细胞的增殖和侵袭而进一步增加细胞的恶性表型,其将来可作为16q缺失亚型HCC的潜在治疗靶标,为HCC的诊断与治疗提供新的依据.
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目的:探讨灭活母牛分枝杆菌雾化吸入对哮喘小鼠γδT细胞TLR3表达的影响.方法:将雄性Balb/c小鼠24只随机分为4组,正常组、哮喘组、低浓度组、高浓度组,每组6只.哮喘组、低浓度组、高浓度组用鸡卵清蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型,低浓度组用1.125μg/mL灭活母牛分枝杆菌雾化吸入干预,高浓度组用2.250μg/mL灭活母牛分枝杆菌雾化吸入干预,正常组用PBS进行处理和干预,哮喘组用PBS进行干预.OVA末次激发后24 h内,测小鼠气道相对阻力,麻醉处死小鼠后取左肺包埋切片行HE染色、糖原染色(PA
目的:研究山枝子茎叶提取物(SZZJYE)对小鼠急性肝损的保护作用及机制.方法:分别采用四氯化碳(CCl4)、D-氨基半乳糖(D-Gal)腹腔注射小鼠,建立急性肝损伤模型.将昆明种小鼠随机分为正常对照组、CCl4及D-Gal模型组、阳性对照组(联苯双酯,150 mg/kg)及SZZJYE高、中、低剂量(5.00 g/kg、2.50 g/kg、1.25 g/kg)组,每组10只.测定各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性和总胆红素(TBIL)含量,肝组织丙二醛(MD
目的:探讨聚乙二醇修饰的四氧化三锰纳米粒子(Mn3O4-PEG NPs)对过氧化氢(H2O2)诱导的软骨细胞炎症模型的抗炎抗氧化作用.方法:合成Mn3O4-PEG NPs并对其进行表征.通过CCK-8法和细胞活死染色法检测Mn3O4-PEG NPs对软骨细胞活性的影响.体外检测Mn3O4-PEG NPs的拟超氧化物歧化酶活性(SOD)、拟过氧化氢酶酶活性(CAT)和清除羟基自由基(·OH)的作用.将由H2O2诱导的软骨细胞炎症模型与Mn3O4-PEG NPs共培养后,通过逆转录获得cDNA,再用RT-qP
目的:探索类固醇分泌功能的肾上腺皮质三维培养体系.方法:选取2019—2021年于广西医科大学第二附属医院的流产胚胎肾上腺组织,消化成细胞悬液,基质胶包裹三维培养.培养基中添加FGF2生长因子,Wnt信号通路激活因子(CHIR99021、R-spondin1),通过病理组织染色、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫荧光和透射电镜等方法检测相关基因及蛋白表达水平,并分析其对于类固醇分泌功能培养体系建成的影响.结果:(1)添加FGF2生长因子后,3D培养球体直径明显增加.(2)添加CHIR9
目的:探讨SPAG6在鼻咽癌(NPC)中的表达及其对NPC细胞增殖的影响.方法:使用GEO数据库比较SPAG6在NPC和正常鼻咽上皮组织(NNE)中的转录表达水平,分别采用RT-qPCR法和免疫组织化学染色法检测SPAG6 mRNA及蛋白表达水平.利用甲基转移酶抑制剂5-aza-dC处理NPC细胞后检测SPAG6 mRNA相对表达量.CCK-8法检测SPAG6对NPC细胞增殖的影响.结果:SPAG6 mRNA表达在NPC中明显下调(P<0.05).NPC组织中SPAG6启动子区甲基化程度高于正常鼻咽组织(
目的:研究二去水卫矛醇(DAG)对人非小细胞肺癌(NSCLC)H460细胞体内抗癌作用及其机制.方法:建立裸鼠人NSCLC H460细胞移植瘤模型,分为模型组、阳性对照组及DAG低、中、高剂量组(DAG-L组、DAG-M组、DAG-H组).采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,分别采用RT-qPCR法和Western blotting法检测肿瘤组织凋亡相关基因和蛋白表达.结果:与模型组比较,DAG各剂量组和阳性对照组瘤体体积和瘤重减小,抑瘤率均高于40％,肿瘤细胞凋亡率增高(均P<0.05);DAG-M组、D
目的:评价贺氏火针治疗功能性消化不良脾胃虚寒证患者的临床疗效。方法:选择2017年3月－2019年3月首都医科大学附属北京中医医院功能性消化不良脾胃虚寒证患者60例，在研究过程中自然形成2个队列，分别暴露在2种不同的干预措施中，其中对照组30例口服莫沙必利片，治疗组30例在对照组基础上结合火针点刺治疗。2组均治疗4周，随访1个月。分别于治疗前后进行临床症状评分，采用健康状况相关生活质量量表（SF-36）评价患者生活质量，记录治疗期间的不良事件，评价临床疗效。结果:治疗组总有效率为93.3%（28/30）、
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目的:探讨中波紫外线(UVB)辐射导致人角质形成细胞(HaCaT细胞)光老化的模型构建及机制研究.方法:体外培养HaCaT细胞分为空白组和实验组,模型组细胞用不同照射剂量的UVB照射,空白组细胞不予紫外线照射,采用CCK-8法检测细胞相对活力,筛选出最适合的照射剂量用于建立光老化模型;应用同样的方法体外培养HaCaT细胞,分为空白组和模型组,模型组细胞使用筛选出的UVB照射剂量,空白组细胞不予紫外线照射,应用试剂盒检测光老化细胞模型的相关因子.结果:照射剂量为60 mj/cm2时,细胞增殖率接近空白组的5