低氧相关的R-脊椎蛋白3对人乳腺导管癌细胞增殖能力的影响及其机制

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目的

体外观察低氧微环境对乳腺癌细胞增殖能力的影响,并探讨其分子机制。

方法

细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)用于人乳腺导管癌细胞株(BT-474,购于中国科学院上海细胞库)经低氧处理后的增殖能力;应用基因芯片对低/常氧处理后的细胞进行差异基因的表达检测,并在体外行实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证;运用癌症基因组图谱(TCGA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库分析筛选的差异基因在乳癌及正常乳腺组织中的表达特征,并分析其水平与患者临床病理学特征及预后的相关性;基因组百科全书(KEGG)通路分析、基因过表达实验、蛋白质印迹法(Western blot)等方法探讨其发挥功能的分子机制,组间比较采用t检验。

结果

BT-474细胞分别经常氧、低氧干预24、36、48 h后,常氧组中的吸光度值显著低于低氧组(0.32±0.03比0.40±0.02,t=6.351;0.45±0.01比0.52±0.02,t=4.196;0.57±0.04比0.68±0.03,t=3.257;P

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