观察新型胰高血糖素受体/葡萄糖依赖性促胰岛素受体双受体激动剂DA-JC1对β-淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)引起的C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱以及小鼠海马HT22神经细胞period1基因/蛋白表达异常的影响。
方法(1)选取6～8周龄雄性C57BL/6小鼠进行跑轮行为学实验，分析DA-JC1在改善Aβ31-35所致小鼠昼夜节律紊乱中的作用。(2)选取HT22神经细胞，采用随机数字表法将其分为对照组、Aβ31-35组、DA-JC1预处理组、DA-JC1组(各组n＝4)，采用四甲基偶氮唑盐法检测各组细胞的存活率。采用实时荧光定量PCR方法检测各昼夜时间的时间点period1基因表达水平，通过蛋白质印迹方法检测period1差异最大昼夜时间的period1蛋白表达水平，观察DA-JC1对Aβ31-35引起的小鼠海马HT22神经细胞period1表达异常的影响。
结果(1)与对照组相比，Aβ31-35引起小鼠自由运转周期显著延长[( 23.80±0.06) h与(23.54±0.07) h，t＝0.265，P＝0.010]，DA-JC1预处理后显著缩短了Aβ31-35引起的自由运转周期延长[( 23.61±0.06 ) h，t＝0.193，P＝0.047]。(2)与对照组相比，5 μmol/L Aβ31-35可引起HT22细胞存活率显著降低(78.7%±3.4%与100.0%±3.6%，t＝12.393，P＝0.005)，而DA-JC1预处理1 h后细胞存活率明显回升( 89.2%±2.3%, t＝9.748，P＝0.048) 。(3)Aβ31-35导致HT22细胞period1表达异常，表现在昼夜时间12时(period1基因：0.58±0.04；period1蛋白：0.74±0.07)较对照组(period1基因：1.00±0.09，t＝0.419，P＝0.001；period1蛋白：1.01±0.07，t＝0.221，P＝0.007)表达显著降低，DA-JC1可以逆转Aβ31-35在昼夜时间12时诱导的HT22细胞period1表达水平降低(period1基因：0.79±0.11，t＝0.279，P＝0.024；period1蛋白：0.99±0.05，t＝0.226，P＝0.009)。
结论DA-JC1可以有效缓解Aβ31-35所致C57BL/6小鼠昼夜节律紊乱，同时可以有效改善Aβ31-35所致HT22细胞中period1表达异常。