葡萄糖调节蛋白94在膀胱肿瘤中的表达及其对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响

来源 :现代泌尿生殖肿瘤杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zifeng_ok
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目的 观察葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在膀胱肿瘤组织和细胞中的表达情况,并下调膀胱肿瘤细胞内GRP94表达,检测其对肿瘤细胞凋亡及迁移能力的影响,探讨其可能机制.方法 选取35例膀胱尿路上皮癌组织和35例癌旁组织,应用免疫组化方法检测GRP94在两种组织中的表达,同时应用Western blot法检测GRP94在正常膀胱上皮细胞株和膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达;设计合成可靶向结合GRP94序列的小干扰RNA(siGRP94),将其导入膀胱尿路上皮癌SW780细胞株,随后应用Western blot法检测SW780细胞内GRP94的表达情况;并分别应用流式细胞术检测凋亡率,Transwell法检测迁移能力;同时应用Western blot法检测细胞内caspase-9、Bcl-2、Bax和vimentin表达情况.结果 膀胱尿路上皮癌组织中GRP94表达的平均光密度值明显高于癌旁组织(P<0.01),膀胱尿路上皮癌细胞株中GRP94表达明显高于正常膀胱上皮细胞株(P<0.01);siGRP94转染后48 h,SW780细胞内GRP94表达较空白组和阴性对照组明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显上升(P<0.01),同时迁移能力明显下降(P<0.01);凋亡调控蛋白中,caspase-9前体表达下调同时剪切体表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调同时Bax表达上调(P<0.01);细胞迁移相关蛋白波形蛋白表达明显下调(P<0.01).结论 GRP94在膀胱尿路上皮癌中呈高表达,下调其表达水平可诱导膀胱肿瘤细胞发生凋亡并抑制细胞迁移能力,GRP94可能具有成为膀胱肿瘤治疗靶基因的潜力.
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