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目的：建立RP-HPLC测定罗汉果药材中罗汉果皂苷V含量的方法。方法：采用Alltima-C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，乙腈-水（23：77）为流动相，流速1．0mL·min^-1，检测波长203nm，柱温32℃。结果：罗汉果皂苷V线性范围为0．17-4．2μg，平均回收率为99．05％（RSD；0．78％，n=9）。结论：所建立的方法结果稳定，回收率良好,可用于测定罗汉果药材中罗汉果皂苷V的含量。