【摘 要】
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蛋白间的相互作用对于生物学功能的发挥是非常重要的。MADS-box基因的功能主要通过形成同源或异源二聚体或四聚体来实现。水稻OsMADS15是一个AP1/SQUA亚家族的成员,在水稻开
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蛋白间的相互作用对于生物学功能的发挥是非常重要的。MADS-box基因的功能主要通过形成同源或异源二聚体或四聚体来实现。水稻OsMADS15是一个AP1/SQUA亚家族的成员,在水稻开花时间调控、不定根的发育、茎的生长和内稃的发育等过程中具有重要作用,但与之有相互作用的蛋白却知之甚少。本实验用酵母双杂交法从水稻(Oryza sativa ssp.japonica)cDNA文库中筛选与OsMADS15有相互作用的蛋白。构建了pGBKT7-OsMADS15诱饵表达载体,然后与pGADT7-cDNAlibrary共转化到酵母(Sac charomyces cerevisiae)AH109中,通过顺序筛选HIS3、ADE2和LacZ3个报告基因的表达,共得到25个UniGene。在烟草(Nicotiana benthamiana)细胞中用BIFC实验验证OsMADS15和候选基因OsMADS1、OsMADS14、OsMADS8之间的相互作用,结果表明在烟草细胞的核内,OsMADS15相连的nYFP可以与OsMADS1、OsMADS14、OsMADS8相连的cYFP分别形成互补而产生荧光,证实其间在植物体内也具有相互作用。本实验为今后近一步研究OsMADS15在水稻花发育和水稻营养器官生长发育中的功能提供了基础资料。
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