【摘 要】
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目的 探讨血液miRNA-548ah在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同时期的表达,并分析其临床价值.方法 选取2015年1月至2019年1月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的108例慢性HBV感染者为研究对象(HBV感染组),根据分期不同将108例患者分为免疫耐受期组(32例)、免疫清除期组(28例)、低复制期组(25例)和再活动期组(23例);另外选取同期100例健康体检者为对照组.采用采用Exo Quick试剂盒提取血液外泌体,并采用Western blot蛋白质印记法验证外泌体的真实性;采用实时荧
【机 构】
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445000 恩施土家族苗族自治州,恩施土家族苗族自治州中心医院临床检验中心;445000 恩施土家族苗族自治州,恩施土家族苗族自治州中心医院病理科
【出 处】
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中华实验和临床感染病杂志（电子版）
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目的 探讨血液miRNA-548ah在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同时期的表达,并分析其临床价值.方法 选取2015年1月至2019年1月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的108例慢性HBV感染者为研究对象(HBV感染组),根据分期不同将108例患者分为免疫耐受期组(32例)、免疫清除期组(28例)、低复制期组(25例)和再活动期组(23例);另外选取同期100例健康体检者为对照组.采用采用Exo Quick试剂盒提取血液外泌体,并采用Western blot蛋白质印记法验证外泌体的真实性;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血液外泌体中miRNA-548ah水平,并收集其血清HBV DNA和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.比较HBV感染组患者和对照组血液外泌体miRNA-548ah差异,并绘制ROC曲线探讨血液外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染不同时期中的应用价值,采用Pearson相关法分析血液外泌体miRNA-548ah与HBV DNA和ALT的关系.结果 蛋白质免疫印迹法检测外泌体表面特异性标志物CD63和Tsg101蛋白阳性,提示外泌体提取成功.HBV感染组和对照组血液外泌体miRNA-548ah水平分别为(3.46±0.83)和(0.72±0.15),差异有统计学意义(t=32.518、P<0.001);ROC曲线分析显示,外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染诊断中具有一定价值(AUC=0.785、95％CI:0.723～0.877、截断值:1.04、敏感性为84.5％、特异度为82.6％).免疫耐受期组、免疫清除期组、低复制期组和再活动期组血液外泌体miRNA-548ah分别为(4.18±1.34)、(1.41±0.45)、(1.32±0.31)和(1.48±0.42),差异有统计学意义(F=27.435、P<0.001);其中免疫耐受期组和免疫清除期组患者差异有统计学意义(t=10.427、P<0.001),免疫清除期组和低复制期组患者差异无统计学意义(t=0.838、P=0.406);低复制期组和再活动期组差异无统计学意义(t=1.510、P=0.138).Pearson相关分析表明,HBV感染免疫耐受期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT均呈显著正相关(r=0.857、P<0.001,r=0.763、P<0.001);HBV感染再活动期患者miRNA-548ah与HBV DNA、ALT均呈显著正相关(r=0.776、P=0.001,r=0.711、P=0.001);HBV感染免疫清除期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT呈正相关,但相关性不显著(r=0.572、P=0.035,r=0.531、P=0.042);HBV感染低复制期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT呈正相关,但相关性不显著(r=0.541、P=0.039,r=0.502、P=0.048).结论 血液外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染者高表达,有望成为诊断慢性HBV感染的新型标志物,且其在HBV感染自然史不同阶段的表达存在差异,与血清HBV DNA和ALT亦相关,可用于指导临床用药并进行及时调整.
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