【摘 要】
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目的 观察miR-204-5p在氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y)损伤中的作用并从炎症/凋亡途径探讨其机制.方法 SH-SY5Y细胞分为control组、OGD/R组、OGD/R+ miR-204-5p mimic组、OGD/R+ miR-204-5p inhibitor组、OGD/R+ miR-204-5p mimic negative control组、OGD/R+miR-204-5
【机 构】
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重庆医科大学重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆400016;重庆医科大学药理学教研室,重庆400016;重庆市垫江县人民医院,重庆408300
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目的 观察miR-204-5p在氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y)损伤中的作用并从炎症/凋亡途径探讨其机制.方法 SH-SY5Y细胞分为control组、OGD/R组、OGD/R+ miR-204-5p mimic组、OGD/R+ miR-204-5p inhibitor组、OGD/R+ miR-204-5p mimic negative control组、OGD/R+miR-204-5p inhibitor negative control组.采用MTT法测定细胞增殖、流式细胞术、TUNEL染色法检测细胞凋亡、酶联免疫法检测炎症因子(IL-1O、IL-1β、TNF-α、PGE2)含量、qRT-PCR检测miR-204-5p的表达、western blot检测炎症及凋亡相关蛋白(COX-2、Bcl-2、Bax)的表达.结果 与对照组相比,OGD/R组细胞miR-204-5p表达显著降低,IL-1β、TNF-α、PGE2含量增多,IL-10含量减少,COX-2、Bax蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下降,细胞损伤明显加重;与OGD/R组比较,miR-204-5p mimic下调COX-2、Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,IL-10含量增加,IL-1β、TNF-α、PGE2含量减少,细胞活力明显增加、凋亡率显著降低,细胞损伤减轻.结论 miR-204-5p对OGD/R致SH-SY5Y细胞损伤具有明显保护作用,其机制可能与减轻细胞炎症和凋亡有关.
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