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目的：构建针对PI3-K/Akt基因的特异性短发卡RNA（shRNA）真核表达载体。方法：用DNA重组技术将针对大鼠PI3-K/Akt基因不同位点所设计的8个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）,Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选最佳沉默效率的shRNA。结果：限制性酶切及核酸序列分析证明重组质粒正确。Western blot证实在重组质粒中shPik3c3-2、shAkt1-4具有最佳沉默效率。结论：