【摘 要】
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从PHA活化的人外周血T细胞中抽提总RNA，经RT—PCR扩增出CTLA-4的全长基因，构建逆转录病毒载体pEGZ-Term／CTLA-4，经PCR及电泳鉴定后感染包装细胞293T。收集培养上清感染L929细胞。
【基金项目】
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江苏省自然科学基金资助项目（BK2004203）,江苏省高校高新技术产业发展基金资助项目（JHB05-45）
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从PHA活化的人外周血T细胞中抽提总RNA，经RT—PCR扩增出CTLA-4的全长基因，构建逆转录病毒载体pEGZ-Term／CTLA-4，经PCR及电泳鉴定后感染包装细胞293T。收集培养上清感染L929细胞。用Zeocin选择培养。经免疫荧光及流式细胞术进行筛选，获取稳定表达CTLA-4分子的细胞株CTLA-4／L929。将CTLA-4／L929经丝裂霉素处理后与体外细胞因子诱导的树突状细胞共同孵育。分别于24、48及72h，用直接免疫荧光法和流式细胞术分析树突状细胞B7—1和B7—2分子的表达。研究
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