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李怀平陈威
710032陕西西安第四军医大学西京医院肾内科
摘 要 目的：探讨疏血通注射液对实验性系膜增生性肾炎大鼠的治疗效果。方法：复制大鼠系膜增生性肾炎模型，治疗组予疏血通注射液治疗，观察其对模型大鼠蛋白尿、肾功能及血浆蛋白的影响以及对肾脏病理的改善。同时设立苯那普利治疗为对照组。结果：疏血通注射液可明显降低尿蛋白，改善功能，减轻肾小球损伤，减少肾小球系膜细胞增生，其改善作用优于对照组。结论：疏血通对大鼠具有保护肾功能，它能减少肾小球系膜细胞增生，减少细胞外基质增多的治疗作用。
材料与方法
动物：选用sD纯种大白鼠，雌性，体重180±10g，12周龄，第四军医大学动物实验中心提供。动物经普通饲料适应性喂养1周后，试纸法尿蛋白定性检查、尿沉渣镜检均呈阴性。随机分为模型组、苯那普利组、疏血通注射液组、正常对照组4组，每组各10只。系膜增殖性肾炎大鼠模型的建立参照刘震等［1］的实验方法，实验在第四军医大学动物实验中心进行。
实验用药：疏血通注射液是由牡丹江友博药业有限责任公司提供，每支2ml。实验动物随机分组，治疗组自造模第1天开始给药，大鼠给药剂量按药理学实验动物给药方法计算，均给以成人剂量每千克体重的5倍灌胃；对照苯那普利治疗组配成生理盐水溶液给以4mg/kg每天灌胃；正常组给相同比例的生理盐水。
检测指标：①24小时尿蛋白定量：双缩脲法。②血浆白蛋白：肌酐、尿素氮自动生化仪检查。③病理光镜：组织固定脱水，将组织切成1.5pm厚切片，用HE、PAS、PASM-Masson染色，观察肾组织的形态学变化。镜检，阳性为红色，分布肾小球系膜区和细胞外基质中。病理电镜0.1mmol/L磷酸盐缓冲液冲洗，1%锇酸固定2小时，丙酮脱水后，环氧树脂618包埋，半薄切片定位，超薄切片经铀、铅双重染色。在电镜下观察。
统计学处理：采用SPSS统计软件包，所有数据均用（ ±S）表示，组间差异采用t检验。
结果
24小时尿蛋白定量测定：造模后第12周测定各组大鼠尿蛋白定量，正常组12.55±1.25mg/24小时，模型组*90.03±1.59mg/24小时，依那普利组*#55±12.24mg/24小时，疏血通组*#▲42±11.35mg/24小时。
肾功能(SCr、BUN)、血清白蛋白(hlb)测定：正常组SCR46.8±9.26mmol/L，BUN5.88±0.71μmmol/L，ALB16.21±1.28g/L；模型组SCR*79.2±9.32mmol/L，BUN*12.03±1.35μmmol/L，ALB*10.82±1.32g/L；依那普利组SCR*#58.9±12.27mmol/L，BUN*#8.10±0.62μmmol/L，ALB*#▲12.92±1.12g/L；疏血通組SCR*#52.8±11.26mmol/L，BUN#7.42±0.77μmmol/L，ALB*#▲12.99±1.13g/L。
注：与正常组比较，*P 肾脏组织病理形态学观察：①光镜组织学变化：正常组肾小球结构正常；模型组病理改变以重度系膜细胞增多、系膜基质增生，肾小球肿胀，体明显增大，肾小球内细胞数增多，肾小球直径和最大系膜区细胞数明显大于正常组。此外，部分切片中还可见蛋白管型。苯那普利组病理呈中度的系膜细胞增多和基质增生改变，肾小球肿胀，细胞数增多；而疏血通组系膜细胞增多及基质增生较轻肾小球肿胀轻，细胞数相对较少，肾小球直径和最大系膜区细胞数明显小于模型组。②电镜模型组可见肾小球系膜区系膜细胞增生，系膜基质增多，上皮细胞可见节段性足突融合或绒毛变，系膜区可见云雾状电子致密物沉积。与模型组相比，疏血通组未见明显系膜细胞增生及系膜基质增多现象。苯那普利组可见系膜区系膜细胞轻度增生，系膜基质增多不明显，系膜区可见少量电子致密物沉积，上皮细胞足突轻度融合。免疫荧光正常组肾小球系膜区无IgG沉积，模型组表现为弥漫性系膜区IgG沉积，呈散在颗粒状，个别区域为团块状。疏血通组与苯那普利组表达较弱。
讨论
我们通过大鼠模型观察疏血通对系膜增生性肾炎的疗效［2］，并与目前全世界公认的治疗肾小球肾炎药物苯那普利进行对照［3］，发现疏血通注射液对系膜增生性肾炎的治疗效果优于苯那普利。
疏血通注射液是由水蛭、地龙组成，水蛭、地龙有破血、逐瘀、通络，并有“利水道”、“渗湿行水”的功能，是祖国医学中治疗肾病的良药。本实验结果表明疏血通注射液活血化瘀能减少血小板聚集，增强纤溶活性，改善微循环和高凝状态，抑制细胞凋亡，改善内皮细胞功能，有助于免疫复合物的清除和肾组织病变的修复［4］。疏血通治疗大鼠MsPGN的结果表明该药能明显减轻MsPGN大鼠的蛋白尿，减轻肾功能损害，改善蛋白质代谢。光镜、电镜及免疫荧光检查结果表明疏血通有促进肾小球病理改变恢复的作用，能减轻系膜区免疫复合物的沉积，改善肾小球局部血液循环，其机理可能与疏血通调节机体免疫功能，抑制系膜细胞增生和系膜基质扩张有关，进一步的的作用机制拟采用基因芯片技术研究其对肾小球系膜细胞基因表达的调控。
参考文献
1 刘震，周树易，谭建三.大鼠系膜增生性肾炎模型的改进.华西医科大学学报，1996，27（2）：182.
2 Kawachi H，Orikasa M，Matsui K，et a1.Epitope-specific induction of mesangial lesions with proteinuria by a MoAb against mesangial cell surface antigen．Clin Exp Immunol，1992，88(3)：399-404.
3 陈香美.血管紧张素转化酶抑制剂减轻肾小球硬化机制的探讨.中华肾脏病杂志，1998，14(3)：139.
4 沈庆法，何立群.肾脏病的中医药研究新进展.上海：上海中医药大学出版社，2004：101.
710032陕西西安第四军医大学西京医院肾内科
摘 要 目的：探讨疏血通注射液对实验性系膜增生性肾炎大鼠的治疗效果。方法：复制大鼠系膜增生性肾炎模型，治疗组予疏血通注射液治疗，观察其对模型大鼠蛋白尿、肾功能及血浆蛋白的影响以及对肾脏病理的改善。同时设立苯那普利治疗为对照组。结果：疏血通注射液可明显降低尿蛋白，改善功能，减轻肾小球损伤，减少肾小球系膜细胞增生，其改善作用优于对照组。结论：疏血通对大鼠具有保护肾功能，它能减少肾小球系膜细胞增生，减少细胞外基质增多的治疗作用。
材料与方法
动物：选用sD纯种大白鼠，雌性，体重180±10g，12周龄，第四军医大学动物实验中心提供。动物经普通饲料适应性喂养1周后，试纸法尿蛋白定性检查、尿沉渣镜检均呈阴性。随机分为模型组、苯那普利组、疏血通注射液组、正常对照组4组，每组各10只。系膜增殖性肾炎大鼠模型的建立参照刘震等［1］的实验方法，实验在第四军医大学动物实验中心进行。
实验用药：疏血通注射液是由牡丹江友博药业有限责任公司提供，每支2ml。实验动物随机分组，治疗组自造模第1天开始给药，大鼠给药剂量按药理学实验动物给药方法计算，均给以成人剂量每千克体重的5倍灌胃；对照苯那普利治疗组配成生理盐水溶液给以4mg/kg每天灌胃；正常组给相同比例的生理盐水。
检测指标：①24小时尿蛋白定量：双缩脲法。②血浆白蛋白：肌酐、尿素氮自动生化仪检查。③病理光镜：组织固定脱水，将组织切成1.5pm厚切片，用HE、PAS、PASM-Masson染色，观察肾组织的形态学变化。镜检，阳性为红色，分布肾小球系膜区和细胞外基质中。病理电镜0.1mmol/L磷酸盐缓冲液冲洗，1%锇酸固定2小时，丙酮脱水后，环氧树脂618包埋，半薄切片定位，超薄切片经铀、铅双重染色。在电镜下观察。
统计学处理：采用SPSS统计软件包，所有数据均用（ ±S）表示，组间差异采用t检验。
结果
24小时尿蛋白定量测定：造模后第12周测定各组大鼠尿蛋白定量，正常组12.55±1.25mg/24小时，模型组*90.03±1.59mg/24小时，依那普利组*#55±12.24mg/24小时，疏血通组*#▲42±11.35mg/24小时。
肾功能(SCr、BUN)、血清白蛋白(hlb)测定：正常组SCR46.8±9.26mmol/L，BUN5.88±0.71μmmol/L，ALB16.21±1.28g/L；模型组SCR*79.2±9.32mmol/L，BUN*12.03±1.35μmmol/L，ALB*10.82±1.32g/L；依那普利组SCR*#58.9±12.27mmol/L，BUN*#8.10±0.62μmmol/L，ALB*#▲12.92±1.12g/L；疏血通組SCR*#52.8±11.26mmol/L，BUN#7.42±0.77μmmol/L，ALB*#▲12.99±1.13g/L。
注：与正常组比较，*P
讨论
我们通过大鼠模型观察疏血通对系膜增生性肾炎的疗效［2］，并与目前全世界公认的治疗肾小球肾炎药物苯那普利进行对照［3］，发现疏血通注射液对系膜增生性肾炎的治疗效果优于苯那普利。
疏血通注射液是由水蛭、地龙组成，水蛭、地龙有破血、逐瘀、通络，并有“利水道”、“渗湿行水”的功能，是祖国医学中治疗肾病的良药。本实验结果表明疏血通注射液活血化瘀能减少血小板聚集，增强纤溶活性，改善微循环和高凝状态，抑制细胞凋亡，改善内皮细胞功能，有助于免疫复合物的清除和肾组织病变的修复［4］。疏血通治疗大鼠MsPGN的结果表明该药能明显减轻MsPGN大鼠的蛋白尿，减轻肾功能损害，改善蛋白质代谢。光镜、电镜及免疫荧光检查结果表明疏血通有促进肾小球病理改变恢复的作用，能减轻系膜区免疫复合物的沉积，改善肾小球局部血液循环，其机理可能与疏血通调节机体免疫功能，抑制系膜细胞增生和系膜基质扩张有关，进一步的的作用机制拟采用基因芯片技术研究其对肾小球系膜细胞基因表达的调控。
参考文献
1 刘震，周树易，谭建三.大鼠系膜增生性肾炎模型的改进.华西医科大学学报，1996，27（2）：182.
2 Kawachi H，Orikasa M，Matsui K，et a1.Epitope-specific induction of mesangial lesions with proteinuria by a MoAb against mesangial cell surface antigen．Clin Exp Immunol，1992，88(3)：399-404.
3 陈香美.血管紧张素转化酶抑制剂减轻肾小球硬化机制的探讨.中华肾脏病杂志，1998，14(3)：139.
4 沈庆法，何立群.肾脏病的中医药研究新进展.上海：上海中医药大学出版社，2004：101.