肠道病毒71型外壳蛋白VP1在Pichia pastoris酵母中的表达

来源 :病毒学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nobank

【摘要】

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利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增肠道病毒7l型(EV71)外壳蛋白VPl基因，经序列测定证实后，构建重组表达质粒pPIC9K／VPl，转化Pichia pastoris酵母宿主菌GS115，甲醇诱导表达。SD

【作者】

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杨国威何雅清薛颖周世力马骊金奇

【机构】

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病毒基因工程国家重点实验室,深圳市卫生防疫站

【出处】

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病毒学报

【发表日期】

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2003年2期

【关键词】

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肠道病毒71型外壳蛋白VPl Pichiapastoris酵母表达逆转录聚合酶链式反应 enterovirustype71 VP1 PichiaPasto

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利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增肠道病毒7l型(EV71)外壳蛋白VPl基因，经序列测定证实后，构建重组表达质粒pPIC9K／VPl，转化Pichia pastoris酵母宿主菌GS115，甲醇诱导表达。SDS-PAGE分析显示：表达产物的分子量约为34kD，与天然VPl大小一致。凝胶薄层扫描分析显示：目的蛋白表达量占培养上清总蛋白的60％以上。ELISA实验表明，重组蛋白VPl具有较好的抗原性。使用饱和硫酸铵分级沉淀法初步纯化的表达产物，能够较特异性地与EV7l感染者血清中的抗体产生反应，而

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