【摘 要】
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根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列,设计合成了1对引物,从pUC18-M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段.对该片段及pGEX-6P-1载体双酶切并连接,成功构建了原核表达载体pGE
【机 构】
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农业部动物检疫所,农业部动物检疫所,中国科学院,解放军军需大学,农业部热带亚热带动物病毒学重点实验室
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根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列,设计合成了1对引物,从pUC18-M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段.对该片段及pGEX-6P-1载体双酶切并连接,成功构建了原核表达载体pGEX-6P-Mt.将此重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,对培养条件及诱导表达条件等影响表达的因素进行了优化;诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析发现,在约34ku处出现了1条特异性的蛋白条带,其分子质量与预期的M截短蛋白的分子质量相符,并随着诱导时间的延长而变化,在诱导后4h达到高峰.结果表明,膜蛋白M基因截短型在大
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