食管癌细胞株中肿瘤干性细胞群的放射生物学特性

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目的 探讨人食管癌细胞株KYSE150和TE1中肿瘤干性细胞群与放射抵抗的关系.方法 采用无血清悬浮培养法富集食管癌细胞株中富含肿瘤干性细胞群的球囊,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其干细胞特性基因表达;采用克隆形成实验检测细胞球囊与亲本细胞放射敏感性的差异,并检测不同细胞群在不同剂量照射后的成球数量;采用流式细胞仪检测放疗前后细胞周期和细胞表面分子标记CD44+ CD271+的表达.结果 无血清悬浮培养法能富集食管癌KYSE150和TE1细胞株中具有肿瘤干性的细胞球囊,并且随着传代代数的增加细胞球囊数量增加,第1、2、3代KYSE150细胞球囊的数量分别为(25±2)个、(37±2)个和(47±3)个,第1、2、3代TE1细胞球囊的数量分别为(15±3)个、(24±3)个和(36±4)个,一定的放射剂量可使KYSE150和TE1细胞成球率增加.KYSE150细胞球囊和亲本细胞的2Gy时细胞存活分数(SF2Gy)分别为0.81 ±0.03和0.69±0.04,TE1细胞球囊和亲本细胞的SF2Gy分别为0.87 ±0.01和0.80 ±0.03,差异均有统计学意义(均P<0.05).KYSE150和TE1亲本细胞照射后出现明显的G2期阻滞.同一放射剂量下,放射对食管肿瘤干性细胞的增殖抑制作用低于食管癌亲本细胞(P<0.05).在0、4、8Gy照射下,KYSE150亲本细胞的CD44+ CD271+细胞比例分别为(1.08±0.03)%、(1.29±0.07)%和(1.11±0.09)%,TE1亲本细胞的CD44+ CD271+细胞比例分别为(1.16±0.11)%、(0.97±0.08)%和(1.45±0.35)%,差异无统计学意义(均P >0.05);KYSE150细胞球囊的CD44+ CD271+细胞比例分别为(35.83±1.23)%、(44.90±1.67)%和(57.77±1.88)%,TE1细胞球囊的CD44+ CD271+细胞比例分别为(16.07±0.91)%、(22.67±1.12)%和(33.27±1.07)%.KYSE150和TE1细胞球囊的4Gy照射组和8 Gy照射组与0Gy照射组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 食管癌KYSE150、TE1细胞球囊含有的肿瘤干性细胞群较亲本细胞更具放射抗拒性,食管癌肿瘤干性细胞群与放射抗拒性产生机制有关.

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