【摘 要】
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结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体，并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中，然后依据载体自身特
【机 构】
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河南省科学院生物研究所有限责任公司,河南省微生物工程重点实验室
【基金项目】
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河南省省级重点实验室专项(122300413214);河南省重点攻关计划项目(142102210087;152102210167);河南省科学院2016年基本科研费项目;河南省科技开放合作项目(152106000052)
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结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体，并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中，然后依据载体自身特性，用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ切取其表达盒并连接到甲醇诱导型载体pPICZαA中的BamHⅠ位点处，经多次重复后获得目的蛋白多拷贝表达载体，线性化后电转化毕赤酵母表达目的蛋白.灵芝免疫调节蛋白LZ8是一个已成功在毕赤酵母中表达的蛋白，作为检验该方法的样本其基因被首先构建到载体pGAPZαA中得到质粒pGAPZαA-LZ8，切
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