【摘 要】
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目的 探讨miR-376a-3p通过靶向调控GRP78抑制胃癌细胞生长与转移的机制。方法 qRT-PCR测定临床胃癌组织与细胞系中miR-376a-3p的表达，并分析miR-376a-3p与胃癌患者预后的关系；双荧光素酶报告基因系统与Western blotting验证miR-376a-3p与GRP78的靶向调控关系，同时检测临床胃癌组织中GRP78蛋白质的表达情况；分别采用Pre-miR-376
【基金项目】
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南通市卫生和计划生育委员会科研课题（QA2019025;WKZL2018053）；
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目的 探讨miR-376a-3p通过靶向调控GRP78抑制胃癌细胞生长与转移的机制。方法 qRT-PCR测定临床胃癌组织与细胞系中miR-376a-3p的表达，并分析miR-376a-3p与胃癌患者预后的关系；双荧光素酶报告基因系统与Western blotting验证miR-376a-3p与GRP78的靶向调控关系，同时检测临床胃癌组织中GRP78蛋白质的表达情况；分别采用Pre-miR-376a、pcDNA-3.1-NC与pcDNA-3.1-GRP78转染MKN45细胞系，CCK-8与EdU实验测定细胞增殖情况，Annexin V-FITC/PI双染实验检测细胞凋亡情况，划痕愈合实验与Transwell实验测定细胞迁移能力，Western blotting测定细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）标志蛋白的表达水平。结果 与正常胃黏膜细胞系GES-1相比，胃癌细胞系（MKN45、AGS、GC9811、HGC27）中miR-376a-3p表达水平显著降低（P＜0.05），且miR-376a-3p低表达患者预后更差（P＜0.05）;miR-376a-3p靶向抑制GRP78蛋白质的表达（P＜0.05）；上调miR-376a-3p表达能抑制MKN45细胞增殖、迁移及EMT（P＜0.05），促进细胞凋亡（P＜0.05），而同时上调miR-376a-3p与GRP78的表达则能逆转此现象（P＜0.05）。结论 miR-376a-3p通过靶向抑制GRP78蛋白表达抑制胃癌细胞生长与转移，提示miR-376a-3p/GRP78分子轴是胃癌可能的诊断和治疗靶标。
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