黄芩素增强Cx32组成的细胞缝隙连接提高顺铂的细胞毒性

来源 :中山大学学报(医学科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:Taurus_God
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【目的】黄芩素在转染并稳定表达Cx32的HeLa细胞上,对顺铂细胞毒性的影响及其与GJ的关系。【方法】SRB检测黄芩素对HeLa32细胞增殖性的影响,Parachute assay检测黄芩素对Cx32组成的GJ功能的影响。细胞集落实验用于检测黄芩素对顺铂细胞毒性的影响及其与Cx32组成的GJ的关系。Western blotting检测对Cx32蛋白的影响。【结果】黄芩素24 h,100μmol/L浓度以下不影响Hela32细胞增殖。黄芩素(0.0125~0.1μmol/L)能浓度依赖性地增强Hela32细胞间的荧光传递。黄芩素(0.1μmol/L)分别作用4 h,12 h,和24 h,细胞间荧光传递最强的作用时间是4 h。在生长融合细胞组(有GJ形成),黄芩素可以提高顺铂对HeLa32细胞的细胞毒性。在生长未融合细胞(无GJ形成),或用GJ抑制剂oleamide阻断GJ功能,黄芩素不改变顺铂对细胞的杀伤作用。多西环素调控HeLa32细胞Cx32的表达与GJ的形成。在生长融合细胞,不表达Cx32(无GJ形成),可以降低黄芩素增强顺铂细胞毒性的作用。在生长未融合细胞(无论Cx表达与否,均无GJ形成),改变Cx表达无此效应。黄芩素0.0125~0.1μmol/L作用细胞4 h,对Cx32蛋白表达没有影响。黄芩素0.1μmol/L,作用细胞4 h,12 h,和24 h,对Cx32蛋白表达没有影响。【结论】黄芩素可增强HeLa32细胞GJ功能,提高顺铂的细胞毒性。黄芩素影响Cx32组成的GJ功能不伴有Cx32蛋白表达的增加。
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