【摘 要】
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[目的]探讨麦长管蚜Sitobion avenae 9个微小RNA(microRNA,miRNA)在两翅型间不同发育阶段的表达模式,揭示其在蚜虫翅型分化中发挥作用的关键时期.[方法]RT-PCR克隆麦长管蚜内参基因U6的cDNA全长序列和9个miRNA,并利用qRT-PCR方法检测9个miRNA在有翅和无翅麦长管蚜不同发育阶段(伪胚胎、1-4龄若蚜和成蚜)的表达.[结果]麦长管蚜U6的cDNA全长为92 bp,与其他昆虫的U6 cDNA序列一致性达80％以上.qRT-PCR结果表明,大部分miRNA在伪胚
【机 构】
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中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;信阳农林学院,河南信阳464000;中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
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[目的]探讨麦长管蚜Sitobion avenae 9个微小RNA(microRNA,miRNA)在两翅型间不同发育阶段的表达模式,揭示其在蚜虫翅型分化中发挥作用的关键时期.[方法]RT-PCR克隆麦长管蚜内参基因U6的cDNA全长序列和9个miRNA,并利用qRT-PCR方法检测9个miRNA在有翅和无翅麦长管蚜不同发育阶段(伪胚胎、1-4龄若蚜和成蚜)的表达.[结果]麦长管蚜U6的cDNA全长为92 bp,与其他昆虫的U6 cDNA序列一致性达80％以上.qRT-PCR结果表明,大部分miRNA在伪胚胎期及若蚜期的相对表达量均较低,在成蚜期相对表达量较高.6个miRNA(miR-277,miR-9a,miR-7,Let-7,miR-1和miR-315)在有翅成蚜中的相对表达量高于无翅成蚜中的;miR-277和miR-9a在有翅成蚜期的相对表达量较高;除miR-315外,miR-277,miR-9a,miR-7,Let-7和miR-1在成蚜期的相对表达量在两翅型间均呈显著差异,且miR-9a在伪胚胎期和miR-315在3龄若蚜期相对表达量在两翅型间也差异显著.其他3个miRNA(miR-8,PC-3p-2743_844和PC-5p-113190_15)在无翅成蚜中的相对表达量高于有翅成蚜中的,其中miR-8和PC-3p-2743_844在有翅成蚜和无翅成蚜期相对表达量显著高于在其他发育阶段,而PC-5p-113190_15的在无翅蚜3龄若蚜期显著高于在其他发育阶段;miR-8在成蚜期以及PC-3 p-2743_844在伪胚胎和成蚜期的相对表达量在两翅型间差异显著,PC-5p-113190_15在3龄若蚜期的相对表达量在两翅型间差异极显著.[结论]麦长管蚜内参基因U6与其他昆虫的U6 cDNA序列具有高度保守性.表达谱分析显示,9个miRNA可能在伪胚胎或成虫阶段在麦长管蚜翅型分化中起调控作用.
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