【摘 要】
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为建立一种灵敏、准确且快速检测马立克氏病病毒（Marek’sdiseasevirus，MDV）的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据马立克氏病病毒PP38基因的一段特异性保守序列设计引物，将MDV的PP38基因构建到19T载体上，将获得的重组质粒作为标准阳性模板，建立针对马立克氏病病毒的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果显示
【基金项目】
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贵州省科技支撑计划项目（黔科合支撑[2021]一般164）； 贵州省级农业科技支撑计划项目（黔科合支撑[2019]2286）； 贵州大学省级教学内容和课程体系改革项目（GZJG20200035）； 贵州省地方家禽产业联合攻关项目（黔财农[2020]175号）；
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为建立一种灵敏、准确且快速检测马立克氏病病毒（Marek’sdiseasevirus，MDV）的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法。根据马立克氏病病毒PP38基因的一段特异性保守序列设计引物，将MDV的PP38基因构建到19T载体上，将获得的重组质粒作为标准阳性模板，建立针对马立克氏病病毒的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果显示所建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法的Ct值与标准品在6.53×101～6.53×108copies/μL范围内呈良好的线性关系，其线性相关系数R2=0.9988，标准曲线方程为Y=-3.271X+39.297，熔解曲线呈现单峰，无非特异性扩增。且检测J亚群禽白血病病毒（ALV-J）、新城疫病毒（NDV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、禽流感病毒（AIV）和鸡传染性贫血病毒（CIAV）时结果均呈阴性，具有良好的特异性。对20份临床组织样品检测结果进行分析发现，与普通PCR检测结果相比阳性率高出20%。本研究建立的检测MDV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法可用于马立克氏病病毒的快速诊断，对马立克氏病的监测具有重要意义。
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