【摘 要】
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目的 运用变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测5种下呼吸道致病性细菌,建立一种快速检测下呼吸道致病性细菌的分子生物学方法.方法 以下呼吸道致病性细菌16S rRNA基因的保守区设计通用引物,并在引物前加上40-bpGC,特异性扩增该基因的保守区和可变区,运用DH-PLC技术对PCR产物进行分析.选取50株临床分离菌株验证该方法的有效性.结果 通用引物可特异性扩增细菌16S rRNA,PCR产物经
【机 构】
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510180,广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸科,510180,广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸科,510180,广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸科,510180,广州医学院附属广州市第一
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目的 运用变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测5种下呼吸道致病性细菌,建立一种快速检测下呼吸道致病性细菌的分子生物学方法.方法 以下呼吸道致病性细菌16S rRNA基因的保守区设计通用引物,并在引物前加上40-bpGC,特异性扩增该基因的保守区和可变区,运用DH-PLC技术对PCR产物进行分析.选取50株临床分离菌株验证该方法的有效性.结果 通用引物可特异性扩增细菌16S rRNA,PCR产物经DHPLC分析后每种细菌均能得到特征性的洗脱峰.DHPLC检测临床分离菌株结果显示,与常规培养方法的符合率为100%.结论 DHPLC技术具有准确、简便、快捷和高通量等特点,在临床检测下呼吸道致病性细菌中具有潜在的应用价值。
其他文献
目的 为进一步研究人类乙肝病毒（HBV）提供接近自然感染状态的理想细胞模型。方法体外二步灌流法分离树嗣原代肝细胞，纯化后的乙肝患者血清感染上述肝细胞，Southern blot和Northern blot检测感染后细胞内的DNA和RNA，ELISA方法检测细胞上清的HBsAg，免疫组化检测细胞内HBsAg的表达。结果可检测出肝细胞内cccDNA（共价闭合环状DNA）、pgRNA（前基因组RNA）和
目的 比较分析克雷伯菌属的种之间16S rDNA和rpoB系统进化发育关系和序列进化特征.方法 选取经生化鉴定的克雷伯菌18株,提取菌株染色体作为模板,分别使用16S rDNA和rpoB通用引物扩增并测序16S rDNA和rpoB序列.与GenBank中目前已公布的8种克雷伯属菌株16S rDNA和rpoB序列各8条、除克雷伯菌外其他肠道菌株的16S rDNA和rpoB序列各9条一起,共计各35条
目的 对粉尘螨(Dermatophagoides farinae)变应原进行分离和鉴定其特异性变应原组分. 方法 采用ELISA检测粉尘螨变应原的生物活性.按常规方法制备粉尘螨浸出液,经SDS-PAGE分离,测定各组分的相对分子质量(M,);同时用对螨过敏的60例病人混合血清(建立血清库)作探针进行Westem blot,鉴定其特异性变应原组分. 结果 SDS-PAGE显示粉尘螨有15条蛋白带,M
目的 对我国新发现的准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地的鼠疫菌株进行基因组差异性区段的比较分析,确定该鼠疫疫源地鼠疫菌株的基因组类型.方法 按常规方法提取鼠疫菌染色体DNA,依据已证实的鼠疫菌22个差异性区段(DFR)设计引物,采用PCR技术检测鼠疫菌基因组差异性基因片段的构成.结果 准噶尔盆地鼠疫菌株的差异性区段结构类型为缺失DFRO1、04、06、07、10、13和DFR15～18,不同于其他鼠疫
2008年4月6—10日由美国微生物协会（ASM）主办，北京协和医院（PUMCH）、中华微生物学和免疫学分会（CMAwm）协办的感染性疾病的诊断和病原菌检测新锐技术会议在北京国际饭店举行。这是ASM第一次在北京举行，也是第一次在亚洲召开这样的会议。目的之一是介绍信息学，包括数据挖掘人工智能，地理定位信息，数学模型的原理和应用，以快速、准确查出大至各大洲、小至一个医院的感染性疾病的突发事件、暴发流行
近年来,肠杆菌科细菌对喹诺酮类耐药不断增加,国内外均有报道对喹诺酮类耐药的志贺菌,本文以志贺菌为例,一是了解和掌握杭州市志贺菌临床分离株喹诺酮耐药的流行趋势,对1998-2007年杭州地区分离到的202株志贺菌进行药敏实验,与2005年全国志贺菌药敏监测点进行比较[余华丽,常昭瑞,张立实,等.国家监测点2005年志贺菌菌型分布和药敏结果 分析.中华流行病学杂志,2007,28(4):370-373
人星状病毒(human astrovirus,HAstV)是引起婴幼儿病毒性腹泻的重要病原体之一,其感染率仅次于轮状病毒.2004年6月-2005年5月我们对武汉地区3岁以下婴幼儿腹泻人群病原学分析的前期研究发现,全年HAstV的检出率为9.87%,以基因1型为主,仅1株基因3型HAstV株(WH1859),为HAstV-3中新的基因亚型.目前国外学者通过对位于HAstV衣壳蛋白编码基因ORF2的
大肠埃希菌是引起人类感染最常见的肠杆菌科细菌[1].细菌耐药性通常由获得耐药基因引起,在抗生素选择性压力下,耐药基因的水平传播使耐药菌株广泛流行,成为一个日益严重的问题.整合子是含有位点特异重组系统和基因盒的遗传结构[2]。
肠球菌为条件致病菌,是医院感染的重要病原菌之一,可引起不同部位的感染,主要以泌尿系统、呼吸道和伤口感染为主.对我院2006年9月-2008年9月间临床分离的102株肠球菌的菌种分布和耐药性进行了回顾性调查分析,现报道如下。