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目的探讨耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床分离株外膜蛋白D(oprD)基因突变与耐药关系。方法应用随机扩增DNA多态性分析(RAPD)技术对10株耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床分离株进行DNA分型,并对不同克隆耐药株oprD基因编码区进行全基因扩增测序和金属酶检测。结果10株耐亚胺培南铜绿假单胞菌均不产金属酶,可分为4个不同克隆。与X63152序列比较,所有耐药菌株oprD基因发生显著变异,变异率大于50%。30、11、9、20、31号克隆株编码区276~387bp之间发生多处点突变,其中308bp G→C突变使其编码的苏氨酸被丝氨酸代替,344bp C→A突变使其编码的赖氨酸被苏氨酸代替,393~412位有20bp DNA片段缺失,其后的核苷酸序列发生移码突变。13、21号克隆株编码区264~273位有10bp DNA片段缺失,产生移码突变,形成终止密码子TAA(319~321bp)。1号克隆株和22号克隆株oprD基因分别发生大片段的碱基置换和多处点突变,变异率分别为54.03%和74.89%。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床分离株oprD基因变异具有多样性。