【摘 要】
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目的 观察5-氟尿嘧啶(5-Fu)对NIT-1细胞株胰岛素分泌、凋亡、超微结构及增殖的影响,探讨其诱发糖尿病的机制.方法 以不同浓度5-Fu处理小鼠胰岛细胞株NIT-1细胞,分别以放射免疫分析法、AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞胰岛素释放量及细胞凋亡率的变化;以透射电镜观察细胞超微结构的变化;以噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖.结果 在5-Fu(5.0～40.0 mg/L)作用下,
【机 构】
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430034,武汉,华中科技大学同济医学院附属普爱医院肿瘤科,武汉大学人民医院,430034,武汉,华中科技大学同济医学院附属普爱医院肿瘤科,华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心,武汉大学人民医
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目的 观察5-氟尿嘧啶(5-Fu)对NIT-1细胞株胰岛素分泌、凋亡、超微结构及增殖的影响,探讨其诱发糖尿病的机制.方法 以不同浓度5-Fu处理小鼠胰岛细胞株NIT-1细胞,分别以放射免疫分析法、AnnexinV/PI双染色流式细胞术检测细胞胰岛素释放量及细胞凋亡率的变化;以透射电镜观察细胞超微结构的变化;以噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖.结果 在5-Fu(5.0～40.0 mg/L)作用下,NIT-1细胞高浓度葡萄糖刺激下(16.7 mmol/L)的胰岛素释放量明显降低,呈剂量依赖性(P＜0.01).5.0、10.0、20.0和40.0 mg/L浓度的抑制率分别为9.2%、30.4%、50.7%和69.4%.在10.0～40.0mg/L浓度范围内凋亡率明显增高(P＜0.05);透射电镜观察显示,凋亡早期线粒体肿胀、内质网扩张,后期则出现染色体边集等典型的凋亡征象.同时,在5-Fu(5.0～160.0mg/L)作用下,细胞增殖明显降低,其作用呈浓度依赖性(P＜0.01)和时间依赖性(P＜0.05).结论 5-Fu可抑制在高浓度葡萄糖刺激下的胰岛β细胞分泌胰岛素,由此所引起的胰岛素分泌下降可能与诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而导致的β细胞超微结构改变及数量减少有关。
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