【摘 要】
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目的 应用重组腺病毒载体介导的趋化素样因子1（CKLFl）基因转染大鼠血管平滑肌细胞（SMC），观察CKLFI对SMC内核因子（NF）一KB活性的影响。方法用腺病毒介导的CKLFl以不同时间梯度转染刺激SMC，采用免疫细胞化学、荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot等方法分析细胞内CKLF1和NF—KB激活表达：结果静息状态下SMC中NF—KB有基础表达量，经CKLF1刺激后2～1
【机 构】
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北京大学人民医院血管外科,100044,北京大学人民医院血管外科,100044,北京大学人民医院血管外科,100044,北京大学药学院分子与细胞药理学系,北京大学人民医院血管外科,100044
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目的 应用重组腺病毒载体介导的趋化素样因子1（CKLFl）基因转染大鼠血管平滑肌细胞（SMC），观察CKLFI对SMC内核因子（NF）一KB活性的影响。方法用腺病毒介导的CKLFl以不同时间梯度转染刺激SMC，采用免疫细胞化学、荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot等方法分析细胞内CKLF1和NF—KB激活表达：结果静息状态下SMC中NF—KB有基础表达量，经CKLF1刺激后2～14d，其活性迅速增加，免疫细胞化学染色细胞质和核呈棕色，CKLF1荧光定量PCR和Westernblot结果分别为1．050±0．0681、3．3090±0．1523、2．854±0．1219、1．705±0．0944、1．435±0．0858和1．186±0．061、2．264±0．185、2．397±0．149、1．617±0．101、1．381±0．033，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。NF—KB的Westernblot结果为1．184±0．111、2．046±0．221、1．747±0．068、1．4984-0．051、1．412±0．087，与对照组比较5～14d差异有统计学意义（P〈0．05）。两组刺激后5～8d为表达高峰期，且NF—KB活性与CKLFI表达量间明显相关。结论CKLF1可导致NF—KB表达增加并随刺激时间梯度改变，提示NF—KB信号通路可能参与了CKLF1对SMC的增殖和迁移作用。
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