慢病毒介导的稳定表达bFGF的胎儿肝脏基质细胞株的建立

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:judy5752
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过重组慢病毒系统感染人胎儿肝脏基质细胞(fetal liver stromal cell,FLSC),建立了能够稳定、高效表达碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的细胞株bFGF/FLSC.从流产胎儿肝脏组织分离富集基质细胞,对其进行了生长特性和表面标志的鉴定,其在体外维持传代35代,依然保持正常的染色体核型.从胎儿骨髓间充质干细胞中克隆得到bFGF基因,构建重组慢病毒载体,感染FLSC,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的低表达和高表达bFGF的两株细胞,RT-PCR和蛋白质印迹证实,细胞株中bFGF基因的稳定表达.RT-PCR结果显示,弱荧光和强荧光表达细胞的bFGF,在mRNA水平的表达分别是转染空载体细胞的2.33倍和6.19倍;蛋白质印迹结果显示,在蛋白质水平表达分别是1.76倍和5.05倍.用建立的bFGF/FLSC作饲养层细胞体外培养人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hES),结果证明,其能在无或少量添加外源bFGF的条件下,维持人ES细胞增殖及其干性达20代.bFGF/FLSC细胞株的建立,将为构建低成本、安全高效的人胚胎干细胞的培养体系及研究造血细胞的发育分化提供适宜的微环境.
其他文献
AIM: To determine whether gastrointestinal (GI) symptoms are more frequent in type 2 diabetic patients and to examine which diabetic factors are associated with
松下HDC—HS900是一款拥有3MOS的数码摄像机产品,作为松下数码摄像机系列产品中的旗舰机型,HS900不仅拥有高达915万像素的成像能力,还内置了220GB硬盘作为存储介质,同时它还支持
Background In order to make posterior fossa decompression for the management of Chiari I malformation simple and less invasive while using direct visualization,
这款机型除了4G网络支持外,配置了双核1.5GHz处理器,1GB的RAM,4.5英寸的屏幕,分辨率达到了1280×800。系统用的依然是Android姜饼,一个800万像素的自动对焦摄像头,带LED补光灯,可以拍
内网安全风险分析现代企业的网络环境是建立在当前飞速发展的开放网络环境中。开放的环境既为信息时代的企业提供与外界进行交互的窗口,同时也为企业外部提供了进入企业最核心
本刊讯空中客车公司母公司欧洲宇航防务集团(EADS)11月10日宣布,推迟A350飞机的交付时间。该型飞机原计划今年年底总装,2013年投入运营。EADS表示,空中客车A350飞机的总装时
Postoperative ileus is a frequently occurring surgical complication, leading to increased morbidity and hospital stay. Abdominal surgical interventions are know
Background Docetaxel (DOC) therapy is well tolerated and shows high response rates in patients with hormone refractory prostate cancer (HRPC). There are many re
村民离开了世代居住的老地方搬迁到这里,他们的生活都得到了安置,每家还分到了适当的土地,他们就利用这些土地种植一些经济作物,继续保持着农民的本色。知福村的绿、亮、净、美、
电力拖动课程是目前机电类职业院校中一门必修的专业课程,而电力拖动线路的安装连接是在维修电工工种中一项需要掌握的动手技能.在教学过程中,如何图文并茂的讲解电力拖动中