观察KIF3A基因沉默和过表达对人三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-231增殖、迁移及侵袭能力的影响。
方法通过慢病毒干扰技术对高表达KIF3A的人TNBC细胞株MDA-MB-231进行KIF3A基因沉默,通过脂质体转染法使KIF3A低表达的人TNBC细胞株MDA-MB-468 KIF3A基因过表达。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测KIF3A基因沉默和过表达效率。应用平板克隆实验、Transwell迁移及侵袭实验检测KIF3A基因沉默和过表达对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,应用SPSS 23.0统计软件分析。
结果Western blot检测显示KIF3A沉默组(KIF3A-shRNA组)细胞中KIF3A的蛋白水平明显低于阴性对照组(Scr-shRNA组),KIF3A过表达组(KIF3A-pEX组)细胞中KIF3A的蛋白水平明显高于阴性对照组(Vector组);平板克隆实验结果显示KIF3A-shRNA组细胞克隆形成数目明显低于Scr-shRNA组[174.80±46.26比293.20±20.93,P<0.01];KIF3A-pEX组细胞克隆形成数目明显高于Vector组[292.00±75.59比151.40±68.58,P<0.05];Transwell迁移实验显示KIF3A-shRNA组穿膜细胞数/低倍视野明显低于Scr-shRNA组[(47.60±5.77)个比(161.40±20.16)个,P<0.01];KIF3A-pEX组穿膜细胞数/低倍视野明显高于Vector组[(262.00±23.35)个比(155.00±29.15)个,P<0.01];Transwell侵袭实验显示KIF3A-shRNA组穿膜细胞数/低倍视野明显低于Scr-shRNA组[(161.40±16.16)个比(281.00±19.77)个,P<0.01];KIF3A-pEX组穿膜细胞数/低倍视野明显高于Vector组[(214.00±34.54)个比(125.40±19.94)个,P<0.01]。
结论KIF3A基因沉默显著抑制TNBC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,而KIF3A基因过表达可显著促进TNBC细胞的增殖、迁移和侵袭能力。