费氏中华根瘤菌042BS结瘤调节基因的克隆及功能检测

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费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)042BS可以在大豆和苜蓿上结瘤.用费氏中华根瘤菌USDA257的nodDl和nodD2基因分别作为探针,与042BS总DNA进行Southern杂交,发现其DNA经EcoRI酶切后分别在3.0kb和6.0kb处各有一条阳性带.回收这两条阳性带附近的DNA片段,建立部分基因文库,克隆到带有nodDl基因的3.0kb片段,以及带有nodD2基因的6.0kb片段.对nodDl和nodD2进行序列分析,结果表明042BS的nodDl与费氏中华根瘤菌根瘤菌USDA257和USDAl91的同源性高达99%,而nodD2与USDA257的同源性为100%.再将nodDl的片段克隆到pBBRIMCS-5载体上,导入豌豆根瘤菌蚕豆生物变种(Rhi-zobium leguminosarum bv.viciae)LPR5054中进行功能检测,显示042BS的nodDl均可被大豆分泌的类黄酮物质染料木黄酮以及苜蓿分泌的类黄酮物质毛地黄黄酮所诱导.
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