利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kim12344

【摘要】

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利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株,为进一步研究TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的TALEN,通过点突变的方法获得包含TRIM5α第7个外显子中

【作者】

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王小莉余庆袁雅红腾智平李东升曾毅

【机构】

：

北京工业大学生命科学与生物工程学院,湖北医药学院附属太和医院生命科学研究所,中国预防医学科学院病毒所

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2016年12期

【关键词】

：

TRIM5α TALEN 恒河猴点突变 tripartite motif 5 alpha TALEN Macaca mulatta site-direc

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利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株,为进一步研究TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的TALEN,通过点突变的方法获得包含TRIM5α第7个外显子中打靶位点1 211-1 224的基因序列并构建点突变donor载体。将打靶TRIM5α基因的TALEN质粒和donor质粒电转入恒河猴肾细胞（LLC-MK2）中,无限稀释法获得单克隆细胞系,通过抽提基因组DNA,再利用PCR技术扩增目标序列并测序筛选出TRIM5α碱基缺失（1 215-1 216）和点突变（1 213

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