ephrinB2基因转染脱落乳牙来源的牙髓干细胞提高其成骨/成牙本质分化的研究

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xushieng
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目的 观察促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4/促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2 (EphB4/ephrinB2)信号通路在调控过表达ephrinB2的脱落乳牙来源牙髓干细胞(SHEDs)成骨/成牙本质分化中的作用。方法 从滞留乳牙中分离出SHEDs,用hEfnB2-GFP-Bsd载体和空载体(GFPBsd)转染后进行成骨/成牙本质分化诱导。用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、碱性磷酸酶实验(ALP)实验、茜素红S染色实验来检测EfnB2-SHEDs组、空载体对照组(VectorSHEDs)的成骨分化效果,并用Western blot、免疫沉淀和免疫共沉淀试验来检测ephrinB2和EphB4磷酸化蛋白表达水平。结果 ALP实验和茜素红S染色实验证实:EfnB2-SHEDs组比Vector-SHEDs组表现出更高的ALP活性和矿化能力。RT-PCR显示:EfnB2-SHEDs组成牙本质/成骨标志物的表达明显高于Vector-SHEDs组,在成骨分化中,EphB4受体通过磷酸化被活化。结论 基因转染ephrinB2能够通过刺激ephrinB2和EphB4的磷酸化来提高SHEDs的成骨/成牙本质分化。
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