大鼠骨粘连蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化

来源 :武汉理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ouyang0078
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将编码骨粘连蛋白(osteonectin,ON)全长的cDNA亚克隆入含tac启动子的表达质粒pGEX-KG中,构建了tac启动子控制的原核表达载体pGEX-KG/ON。转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导3h后表达量达到最高水平,约占菌体总蛋白10%,表达产物以可溶形式存在。通过硫酸铵分级沉淀、超滤膜分离、亲和层析得到骨粘连蛋白。实验证实蛋白有较强的Ca^2+结合活性。
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