【摘 要】
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目的 探讨 miR-519a-3p 对肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。 方法 培养正常肺上皮细胞 BEAS-2B 及肺癌细胞系 NCI-H1299、NCI-H2170 和 PNCI-H1975,RT-qPCR 检测细胞中 miR-519a-3p 和多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶 4（GALNT4）mRNA 表达水平，Western Blot 法检测 GALNT4 蛋白表达水平。 以N
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目的 探讨 miR-519a-3p 对肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。 方法 培养正常肺上皮细胞 BEAS-2B 及肺癌细胞系 NCI-H1299、NCI-H2170 和 PNCI-H1975,RT-qPCR 检测细胞中 miR-519a-3p 和多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶 4（GALNT4）mRNA 表达水平，Western Blot 法检测 GALNT4 蛋白表达水平。 以NCI-H1299 细胞为研究对象，分别构建高表达miR-519a-3p 或低表达 GALNT4 的 NCI-H1299 细胞，Transwell 检测细胞迁移和侵袭，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western Blot 检测细胞中基质金属蛋白酶 2（MMP-2）、MMP-9、活化的半胱天冬酶-3（Cleavedcaspase-3）、磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶（p-PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达水平。 双荧光素酶报告基因实验验证 miR-519a-3p 与 GALNT4 调控关系。 结果 肺癌细胞系 NCI-H1299、NCI-H2170 和 PNCI-H1975 中 miR-519a-3p的表达显著低于肺上皮细胞 BEAS-2B（P< 0. 05），而GALNT4 mRNA 和蛋白的表达显著高于 BEAS-2B 细胞（P<0. 05）。 高表达miR-519a-3p 或低表达 GALNT4 降低了 NCI-H1299 细胞迁移和侵袭数及 MMP-2、MMP-9 蛋白表达（P< 0. 05），而提高了细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3 蛋白表达（P< 0. 05）。miR-519a-3p 靶向负调控 GALNT4 表达。高表达 miR-519a-3p 后，NCI-H1299 细胞中 p-PI3K 和 p-AKT 蛋白表达显著降低（P< 0. 05）。 与仅高表达miR-519a-3的 NCI-H1299 比较，同时高表达miR-519a-3p 和 GALNT4 的 NCI-H1299 细胞迁移和侵袭数及 MMP-2、MMP-9、p-PI3K和 p-AKT 蛋白表达升高（P< 0. 05），而凋亡率和Cleaved-caspase-3 蛋白表达降低（P< 0. 05）。 结论 miR-519a-3p 在肺癌细胞系中呈低表达，高表达miR-519a-3p 可能通过靶向抑制 GALNT4 表达及 PI3K/ AKT 信号通路的激活减弱肺癌细胞的迁移和侵袭性，并诱导细胞凋亡。
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