细胞外信号调节激酶5RNA干扰稳定细胞系的建立

来源 :西南大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:nbxtihc
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ERK5通路是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路家族成员之一,是一种非典型的MAPK通路,也叫做大MAPK通路(Big MAPK/BMK1),可以被各种刺激因素激活,与多种细胞反应(如细胞增殖、分化、转化及凋亡等)及机体多种生理病理过程(如脑发育、癌症及糖尿病等)密切相关.采用RNA干扰的方法,用构建的ERK5干扰质粒干扰ERK5表达,通过RT-PCR和Western-blotting的方法分别在RNA和蛋白水平上来检测ERK5的表达,鉴定干扰效率;通过G418对转染了干扰质粒的鼠恶性黑色素瘤细胞(B16F10细胞)进行稳定筛选,得到ERK5 RNA干扰的B16F10稳定细胞系,为后期的动物实验做准备.
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