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目的 建立高效液相色谱法同时测定大柴胡汤中芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷和黄芩苷含量的方法。方法 采用Diamonsil C18色谱柱（200 mm×4.6 mm, 5μm）,流动相为乙腈（A）-含体积分数为0.1%甲酸的5 mmol·L-1醋酸铵缓冲溶液（B）,梯度洗脱，流速为1.0 mL·min-1。检测波长为230 nm和254 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果 芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷分别在质量浓度2.00～20.0、7.00～70.0、20.0～200、10.0～100 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系（r＞0.999）,平均回收率分别为99.7%、99.2%、98.8%和98.6%;RSD为0.9%、0.6%、0.6%和1.2%（n=9）。结论 本实验建立的方法可以用于大柴胡汤中芍药苷、柚皮苷、新橙皮苷及黄芩苷的含量测定，为大柴胡汤质量控制提供依据。