【摘 要】
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分别靶向PRRSV ORF7基因和PCV4 ORF2基因的高度保守区，设计了2对特异性引物，建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒4型（PCV4）的SYBR GreenⅠ-based双重实时荧光定量PCR方法。PRRSV和PCV4在同一样品中的区别在于它们独特的熔解温度（Tm）,PRRSV为84.5℃,PCV4为79.0℃,而对其他非靶向的猪常见病毒没有显示特定的熔解峰，且
【基金项目】
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河南省科技攻关资助项目（222102110375）； 河南省高校科技创新人才支持计划资助项目（21HASTIT039）； 河南农业大学青年英才资助项目（30500635）；
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分别靶向PRRSV ORF7基因和PCV4 ORF2基因的高度保守区，设计了2对特异性引物，建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒4型（PCV4）的SYBR GreenⅠ-based双重实时荧光定量PCR方法。PRRSV和PCV4在同一样品中的区别在于它们独特的熔解温度（Tm）,PRRSV为84.5℃,PCV4为79.0℃,而对其他非靶向的猪常见病毒没有显示特定的熔解峰，且检测极限分别为PRRSV的81.5 copies/μL和PCV4的41.1 copies/μL。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR和常规PCR方法对30例有呼吸和繁殖衰竭症状的猪临床样本进行检测，检测结果显示，PRRSV阳性率为20.0%（6/30）,PCV4阳性率53.3%（16/30）,且PRRSV阳性样品中PCV4检出率为50.0%（3/6）,较常规PCR检测更灵敏。该方法可能是检测PRRSV和PCV4共感染的一种快速、灵敏和可靠的方法。
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