【摘 要】
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目的:探讨原代大鼠肝细胞分离及培养的简易方法,建立稳定简便的大鼠原代肝细胞分离培养方法。方法:采用改良原位两步循环灌流法及低速离心法分离原代大鼠肝细胞,常规DMEM:高
【机 构】
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浙江中医药大学; 浙江省肿瘤医院;
【基金项目】
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浙江省钱江人才计划资助项目(Q1770802006);浙江省自然科学基金资助项目(Y2101290)
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目的:探讨原代大鼠肝细胞分离及培养的简易方法,建立稳定简便的大鼠原代肝细胞分离培养方法。方法:采用改良原位两步循环灌流法及低速离心法分离原代大鼠肝细胞,常规DMEM:高糖培养基培养原代大鼠肝细胞,测定1周内生长情况,倒置显微镜及扫描电镜观察肝细胞形态变化。结果:倒置显微镜下观察肝细胞在接种后3 h基本完成贴壁,贴壁的细胞呈卵圆形,24 h后胞体变大变平,随后细胞相互靠拢呈岛状或条索状连接,3 d后扫描电镜下细胞呈现良好形态。结论:用改良原位两步循环灌注法及低速离心法成功分离并培养原代大鼠肝细胞,可操作性强,可在具备基本细胞培养条件的实验室推广。
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