【摘 要】
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目的 探讨鹰嘴豆芽异黄酮（isoflavones extracted from chickpea sprouts, ICS）对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响及机制。方法 采用CCK-8法检测不同浓度ICS（0、0.1、0.5、1、5、10、50、100 mg/L）对MC3T3-E1细胞在24、48、72 h的增殖作用。成骨诱导培养基中加入不同浓度ICS（0、0.5、1、5 mg/
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81860746; 82060411）； 新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目（2021D01D21）；
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目的 探讨鹰嘴豆芽异黄酮（isoflavones extracted from chickpea sprouts, ICS）对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化的影响及机制。方法 采用CCK-8法检测不同浓度ICS（0、0.1、0.5、1、5、10、50、100 mg/L）对MC3T3-E1细胞在24、48、72 h的增殖作用。成骨诱导培养基中加入不同浓度ICS（0、0.5、1、5 mg/L）观察其对成骨分化不同指标的影响：诱导第7天进行碱性磷酸酶（alkaline phosphatease, ALP）染色观察酶活性；第21天进行茜素红染色观察钙沉积；RT-qPCR检测诱导7 d各组Runt相关转录因子2（runt-related transcription factor 2,RUNX2）、骨钙素（osteocalcin, OCN）和1型胶原蛋白（collagen-1,COL1）mRNA表达水平；通过Western Blot检测诱导7 d RUNX2和COL1的表达水平，同时加入雌激素受体（estrogen receptor, ER）抑制剂ICI 182,780（1μmol/L）,检测对成骨分化相关蛋白RUNX2和COL1蛋白表达的影响。结果 ICS在0～10 mg/L浓度范围促进了细胞的增殖（P＜0.05）,当浓度大于10 mg/L时对细胞有毒性作用（P＜0.05）;与对照组（0 mg/L）比较，ICS浓度为0.5、1、5 mg/L均能促进ALP活性，具有显著差异，且具有剂量依赖性；诱导21 d后茜素红染色结果显示，ICS能够促进钙沉积，随剂量升高钙结节数量明显增多，具有统计学差异；ICS能够上调成骨分化相关基因RUNX2、OCN和COL1的mRNA转录水平（P＜0.05）,促进成骨分化相关蛋白COL1、RUNX2的表达（P＜0.05）;雌激素受体抑制剂ICI 182,780抑制ICS对成骨分化相关蛋白COL1、RUNX2的表达（P＜0.05）。结论 ICS能够促进小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1的增殖，并通过上调成骨分化相关基因及蛋白的表达，诱导MC3T3-E1细胞的成骨分化，雌激素受体抑制剂ICI 182,780能够抑制ICS的成骨诱导分化作用，推测ICS是通过ER相关通路实现促进成骨分化作用的。
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