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目的
分析单采血小板去白细胞(leukoreduction system, LRS)滤器收集的白细胞替代常规全血人外周血白细胞的可行性,并对两个来源的T细胞进行了体外生物学和表型比较分析。
方法本实验用同一志愿者LRS滤器中富集的白细胞和血液检测后剩余的全血经淋巴细胞分离液(Ficoll)分离成单个核细胞,用流式细胞仪对细胞表型比较分析。同时经磁珠分选出CD3+T细胞,加入CD3、CD28激发型抗体与IL-2体外扩增培养10 d,并以细胞计数、流式细胞仪检测以及CBA细胞因子分泌测定等方法,对比LRS滤器血与全血分离出T细胞表型和生物学功能的差异。
结果LRS滤器血与全血分离出的细胞,初始状态表型相似度极高;LRS滤器血的CD3+T细胞分选率非常高,达到了实验要求。经扩增后的细胞的数量、表型、共刺激分子的表达、细胞因子分泌的数值都很相似,差异无统计学意义。
结论本研究证实了LRS滤器血分离的T细胞在活力、表型和功能方面可以替代全血中的T细胞应用于基础实验研究,为解决临床用血和实验用血的矛盾提供了新途径。