鼠抗脂多糖单链噬菌体抗体库的构建

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alfred0612
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目的 构建一个鼠源性的抗脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)单链噬菌体抗体库,以供进一步生物医学应用。方法 用纯LPS免疫BALB/c小鼠4个星期后,从脾细胞中提取总RNA,用RT-PCR技术扩增出小鼠抗体重链、轻链可变区基因(VH,VL),然后用Linker将VH,VL交联形成单链抗体可变区片段(ScFv)。经NotI、SfiI双酶切后与经同样双酶切的pCANTAB5E噬菌粒载体相连,转化入感受态大肠杆菌TG1,构建鼠抗LPS单链噬菌体抗体库,并随机抽取转化后的4个大肠杆菌TG1菌落,
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