【摘 要】
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[目的]明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响.[方法]以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序列,测序后利用反向剪接位点验证其成环方式.利用PARISTM Kit提取细胞核与细胞质RNA检测其在细胞中的核质分布情况.合成circ-ZNF326全长序列并利用双酶切及T4连接酶将circ-ZNF326全长序列连接在PLCDH-ciR真核表达载
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,武汉430064;西南科技大学生命科学与工程学院,绵阳621010;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,动物胚胎工程及分子育种湖北省
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[目的]明确circ-ZNF326的基本特征及对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响.[方法]以绿头鸭为研究对象,采集鸭胚肠道并培养小肠上皮细胞,提取RNA并反转录为cDNA,参考circ-ZNF326的全长序列设计引物,通过PCR反应扩增获得circ-ZNF326的部分序列,测序后利用反向剪接位点验证其成环方式.利用PARISTM Kit提取细胞核与细胞质RNA检测其在细胞中的核质分布情况.合成circ-ZNF326全长序列并利用双酶切及T4连接酶将circ-ZNF326全长序列连接在PLCDH-ciR真核表达载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞扩大培养,提取重组质粒进行双酶切及琼脂糖凝胶电泳检测,将circ-ZNF326过表达载体转染小肠上皮细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测circ-ZNF326过表达后的表达效率,利用CCK-8检测过表达circ-ZNF326对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的影响.[结果]circ-ZNF326是由ZNF326基因第10、11和12号外显子反向剪接而成,且主要分布在细胞质中.circ-ZNF326过表达载体构建成功,表达效率极显著高于空载组(P＜0.01).将circ-ZNF326过表达载体转染小肠上皮细胞,结果发现,circ-ZNF326过载组在24～72 h细胞活力极显著或显著高于空载组(P＜0.01;P＜0.05).[结论]本试验成功验证了circ-ZNF326的反向剪接与环状结构,证明了circ-ZNF326主要富集在细胞质中,并构建了circ-ZNF326过表达载体,证实了过表达circ-ZNF326可提高蛋鸭小肠上皮细胞的活力,为深入研究circ-ZNF326的生物学功能及其对蛋鸭小肠上皮细胞增殖的调控机制奠定了理论基础.
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[目的]克隆郏县红牛DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,POLB)基因,并对其进行生物信息学分析.[方法]以郏县红牛肌肉组织cDNA为模板,通过PCR方法克隆POLB基因完整CDS区序列;利用在线软件进行遗传距离分析并构建系统进化树,分析POLB蛋白的理化性质、疏水性、磷酸化位点、跨膜结构、信号肽、二级结构、三级结构和互作蛋白.[结果]郏县红牛POLB基因CDS区序列全长1008 bp,编码335个氨基酸.系统进化树分析表明,郏县红牛POLB基因氨基酸序列与绵羊等反刍动物的亲缘关系最近
动物的肠道内有复杂而动态的微生物生态系统,这些微生物通过促进营养摄取、宿主防御、免疫调节等,在维持机体健康方面起着至关重要的作用.菌落的结构组成因母体、饲粮、环境、生理状态变化及自身菌种间互作等因素而不同.水禽(鸭和鹅)属于卵生动物,与哺乳动物相比,其肠道的微生物系统具有特殊性.作者介绍了水禽肠道微生物的建立、肠段不同部位的微生物群结构组成特征及发育性变化,从肠道微生物对水禽生长性能、养分消化吸收的影响,以及与免疫系统的关系3个方面阐述了水禽肠道微生物的主要功能,同时通过饲粮组成、动物体生理状态、外界环境
[目的]探讨饲粮蛋氨酸对肉鸡高密度饲养下生长性能、抗氧化和应激反应的影响.[方法]选取1日龄爱拔益加(AA)肉鸡396只,1～21日龄统一饲喂,于21日龄末选取体重相近的肉鸡随机分为5个处理,每个处理6个重复.对照组肉鸡饲养密度为14只/m2,蛋氨酸水平为0.40％;4个试验组肉鸡饲养密度为20只/m2,饲粮蛋氨酸水平分别为0.35％、0.40％、0.45％和0.50％.试验期21 d,于42日龄采集血浆、肝脏样品,测定应激和抗氧化能力相关指标.[结果]①与正常密度组相比,高密度饲养显著降低了42日龄肉鸡
灵芝的重要生物活性成分之一——灵芝多糖,主要存在于灵芝菌丝体和子实体中.灵芝多糖在机体内发挥抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、提高免疫功能、降血糖血脂和保护肝脏等多种生物学功能.本文主要综述灵芝多糖的生物学功能及在畜禽生产中预防、治疗、保健等应用的研究进展,为灵芝多糖在畜牧业和饲料业中更好地运用与研究提供理论基础.
随着分子生物学和动物遗传育种技术的快速发展,对于畜禽优良性状的研究已从对表型选育进入到对单个或多个重要性状关联基因的分子选育,如对猪肉质性状的相关研究,在影响猪背膘厚、肌内脂肪含量、火腿重量等方面筛选到许多关键基因.近年来,非洲猪瘟肆虐,对猪抗病的研究再次成为热点,也发现了众多关键基因,如CD163直接参与了猪呼吸与繁殖综合征病毒的侵入机制.除了疾病的影响外,繁殖性状对养猪业的发展也起着至关重要的作用.随着研究人员对各重要性状研究的不断深入,现已积累了大量重要育种价值基因的多维数据,且由此开发出了多种基因
白蚁是自然界中高效的木质纤维素降解者.反刍动物虽然可以对粗纤维降解,但其对粗纤维降解作用有限,反刍动物的粪便中仍然含有大量可降解纤维素.白蚁在自身和微生物互作下,可以对粗纤维进行降解且降解效率显著高于瘤胃,其降解产物为乙酸等挥发性脂肪酸,这些挥发性脂肪酸可以被反刍动物利用.本文综述了白蚁的消化特点、白蚁肠道纤维降解微生物的机制及其在反刍动物生产中的开发前景,为白蚁生物资源在反刍动物上的开发及应用提供理论依据.
[目的]本研究旨在对云南半细毛羊精子冷冻前后差异表达的基因与精子冷冻损伤的关系进行研究.[方法]采用电刺激法采集3只云南半细毛羊精液,各分成2份,一份直接用于提取精子RNA,另一份经过冷冻保存7d后再进行精子RNA提取.利用获得的精子RNA,采用单细胞转录组测序技术分别检测新鲜精子和冻融精子的mRNA转录组,构建mRNA转录组文库,用Hiseq2500测序仪进行测序,对测序结果做进一步过滤处理,然后对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路分析.[结果]6份精液样本共产生623399754条原始测序序列
[目的]本试验旨在研究小檗碱对黄羽肉鸡器官指数、抗氧化能力和肠道免疫功能的影响.[方法]选用1日龄快大型岭南黄羽肉鸡360只,随机分为3组,每组6个重复,每重复20只.对照组(NC)饲喂基础饲粮;抗生素组(PC)饲喂基础饲粮+200 mg/kg土霉素钙+250mg/kg那西肽;小檗碱组(BBR)饲喂基础饲粮+250 mg/kg小檗碱.在试验第21、42和63天,从每个重复中随机挑选1只接近平均体重的鸡,采集心脏、肝脏、脾脏和法氏囊分别称重,记录重量,计算其器官指数;刮取空肠黏膜,测定超氧化物歧化酶(T-S
[目的]对毛囊角蛋白关联蛋白11.1(keratin associated protein 11.1,KAP11.1)基因进行克隆及原核表达,并对KAP11.1基因在不同品种绵羊皮肤毛囊中表达量进行比较,探究KAP11.1基因在南疆地方绵羊品种间表达差异及其对羊毛品质的影响.[方法]以平原型和田羊、山区型和田羊和卡拉库尔羊体侧皮肤毛囊为研究材料,以GenBank中绵羊KAP11.1基因序列(登录号:HQ595347.1)为参照设计引物,对KAP11.1基因进行PCR扩增,构建pMD19-T-KAP11.1
动物性情对于集约化养殖中畜禽的健康及生产性能有重要的影响.动物健康和生产性能上的个体差异可能是由其脑-消化道-微生物轴相互作用引起.本文主要综述动物性情对动物健康与生产性能的影响及其影响健康与生产的脑-消化道-微生物轴双向调控机制,以期为消化道微生物及其宿主间代谢互作关系的研究提供新思路.