人参总皂苷在巨噬细胞RAW264.7中降低脂多糖诱导的炎症和氧化应激

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目的:本研究通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7建立炎症和氧化应激模型,探讨人参总皂苷(total ginsenosides extract,TGS)的抗炎和抗氧化效果以及对LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7自噬水平的影响。方法:培养RAW264.7细胞,给予LPS刺激并加入不同浓度TGS,使用硝酸还原酶法检测细胞内一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测小鼠肿瘤坏死因子α(tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的分泌;DCFH-DA荧光探针法检测TGS处理后活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化;超氧化物阴离子荧光探针(dihydroethidium,DHE)检测细胞内超氧化物阴离子水平;吖啶橙染色法(acridine orange,AO)检测自噬体的形成;Western blot法检测COX-2、NF-кB、Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM、Beclin1、ATG7和LC3的蛋白表达。结果:与LPS模型组相比,随着TGS的浓度增加,细胞NO水平、TNF-α的分泌降低,细胞内ROS和超氧阴离子的含量降低,TGS增加了巨噬细胞RAW264.7酸性自噬体的数量;TGS提高了Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM、Beclin1、ATG7及LC3的蛋白表达,降低了COX-2、NF-кB的蛋白表达。结论:在RAW264.7巨噬细胞中,人参总皂苷可通过NF-кB、Nrf2/ARE通路以及提高自噬水平来降低LPS引起的炎症反应和氧化损伤。
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