【摘 要】
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为探究雌二醇（17β-E2）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠Raw264.7细胞炎症反应的影响及作用机制,使用LPS刺激Raw264.7诱导细胞炎症为模型,试验分为Mock、LPS、E2和E2+LPS组,分别用qRT-PCR方法检测各组TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA表达水平,用ELISA法检测各组细胞上清中IL-1β分泌量变化,用Western blot法检测各组细胞中IL-1
【机 构】
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浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金资助项目（31802258）； 浙江农林大学科研发展基金资助项目（2018FR015,2015FR042,2020FR045）； 浙江省自然科学基金资助项目（LQ20C180002）； 浙江省教育厅科研基金资助项目（Y202044917）；
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为探究雌二醇（17β-E2）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠Raw264.7细胞炎症反应的影响及作用机制,使用LPS刺激Raw264.7诱导细胞炎症为模型,试验分为Mock、LPS、E2和E2+LPS组,分别用qRT-PCR方法检测各组TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA表达水平,用ELISA法检测各组细胞上清中IL-1β分泌量变化,用Western blot法检测各组细胞中IL-1β、NF-κB p65、p-IκBα和IκBα的蛋白表达水平,用免疫荧光法观察NF-κB p65在细胞内的表达和定位。结果显示,17β-E2可以不同程度的抑制LPS诱导的Raw264.7细胞TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA的表达,差异显著（P<0.05）,抑制细胞内IL-1β的蛋白表达量和细胞上清中IL-1β的分泌量,差异极显著（P<0.01）;Western blot结果显示17β-E2可以降低LPS诱导的IκBα的磷酸化水平,差异极显著（P<0.01）,抑制NF-κB p65进入细胞核;免疫荧光结果显示17β-E2主要通过ERβ抑制p65入核。综上所述,17β-E2主要通过ERβ抑制NF-κB p65入核,从而发挥抑制LPS诱导的Raw264.7细胞炎症反应的作用。
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