【摘 要】
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为建立快速、灵敏、特异的检测羊口疮病毒(ORFV)的方法,基于羊口疮病毒保守序列B2L基因合成一对用于建立SYBR Green I实时荧光定量PCR的特异性引物,将ORFV B2L全长基因和pMD1
【机 构】
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四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所
【基金项目】
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四川省中央引导地方科技发展专项(2019ZYD084)
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为建立快速、灵敏、特异的检测羊口疮病毒(ORFV)的方法,基于羊口疮病毒保守序列B2L基因合成一对用于建立SYBR Green I实时荧光定量PCR的特异性引物,将ORFV B2L全长基因和pMD19-T质粒载体连接,构建重组阳性质粒,以构建的重组质粒DNA作为模板,建立ORFV SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:所建立的ORFV SYBR Green I实时荧光定量PCR方法线性关系良好,重复性好,扩增效率高,无引物二聚体和非特异性扩增,最低检测限为2.13×101
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