人血小板TGF β的提取纯化及鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dmf625
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目的:建立一种快速、简单、实用的从人血小板提纯转化生长因子β(TGFβ)的方法。方法:改良的白膜回浆法提取人血小板,酸醇抽提裂解法提取血小板中的TGFβ及2 次凝胶过柱法纯化TGFβ。所有提取及纯化步骤均在酸性条件下进行以防止管壁对TGFβ的吸附和生物活性的影响;使用了易挥发的溶媒和缓冲液便于冻干时去除。结果:SDS-PAGE电泳及薄层分析显示纯化后的TGFβ纯度达到89.38% ,在EGF参与下10ng/m l浓度的TGFβ可刺激NRK细胞在软琼脂培养中呈多克隆样生长。结论:运用本方法提取的TGFβ纯度高,生物活性强;与以前方法相比具有成本低廉、提取工艺简单、快速实用的特点。
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