【摘 要】
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为建立一种高效、敏感、特异的用于检测猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的半巢式RT-PCR方法，本研究依据GenBank发表TGEV的 N基因序列设计3条特异性引物，通过优化反应体系，建立了检测TGEV
【基金项目】
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黑龙江八一农垦大学学成引进人才科研启动计划项目（XYB2014-11）;黑龙江省大学生创新创业训练计划项目（201810223047）;黑龙江八一农垦大学三横三纵支持计划项目（ZRCPY201907）;黑龙江省自然科学基金项目（C2018049）;黑龙江八一农垦大学青年创新人才培养项目（CXRC2017016）;“十三五”国家重点研发计划项目（2017YFD0501604-5)
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为建立一种高效、敏感、特异的用于检测猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的半巢式RT-PCR方法，本研究依据GenBank发表TGEV的 N基因序列设计3条特异性引物，通过优化反应体系，建立了检测TGEV的半巢式RT-PCR方法，并对反应体系特异性和敏感性进行了检测。结果显示，该方法能够成功扩增483 bp和338 bp两条目的条带；对TGEV具有良好的特异性，与猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪博卡病毒、猪德尔塔冠状病毒均无交叉反应；最低可检测到1.86×10-1 pg /μL的TGEV cDNA。用所建半巢式RT-PCR对临床50份猪腹泻样品进行检测，结果显示，阳性率为36%，高于普通RT-PCR阳性检出率，且阳性样品符合率为100%。本试验所建立的半巢式RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性好，可准确地对TGEV感染做出诊断，为TGEV的临床检测、流行病学调查提供了有效手段。
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