【摘 要】
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目的：观察妊娠期糖尿病（GDM）患者胎盘组织中Apelin和其受体血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白（APJ）表达情况，探讨其对滋养层细胞胰岛素抵抗（IR）、增殖和侵袭能力的影响。方方法法：收集GDM患者（GDM组，30例）和糖耐量正常（NGT）孕产妇（NGT组，30例）胎盘组织。采用免疫组织化学法检测2组研究对象胎盘组织中Apelin和APJ阳性表达率，Western blotting法检测胎盘组织中
【基金项目】
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湖北省卫健委科研项目（WJ2019M227）；
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目的：观察妊娠期糖尿病（GDM）患者胎盘组织中Apelin和其受体血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白（APJ）表达情况，探讨其对滋养层细胞胰岛素抵抗（IR）、增殖和侵袭能力的影响。方方法法：收集GDM患者（GDM组，30例）和糖耐量正常（NGT）孕产妇（NGT组，30例）胎盘组织。采用免疫组织化学法检测2组研究对象胎盘组织中Apelin和APJ阳性表达率，Western blotting法检测胎盘组织中Apelin和APJ蛋白表达水平，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测胎盘组织中Apelin、APJ和腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK） mRNA表达水平，Pearson相关分析法分析Apelin和APJ mRNA表达水平与AMPK mRNA表达水平的相关性。体外培养滋养层细胞HTR-8/SVneo（HTR-8），分为对照组、Apelin组、高糖组（HG组）、HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组；采用Western blotting法检测各组细胞中Apelin、APJ和胰岛素信号传递中胰岛素受体底物1 （IRS1）、胰岛素受体底物2 （IRS2）和葡萄糖转运蛋白4 （GLUT4）蛋白表达水平及磷脂酰肌醇3-激酶蛋白磷酸化（p-PI3K/PI3K）和AMPK蛋白磷酸化（p-AMPK/AMPK）水平，5-溴-2-脱氧尿嘧啶（EdU）试剂盒检测各组细胞EdU阳性表达率，Transwell小室实验检测各组侵袭细胞数。结果：Apelin和APJ在胎盘绒毛组织中广泛表达；与NGT组比较，GDM组患者胎盘组织中Apelin和APJ mRNA及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。相关性分析，GDM组患者胎盘组织中Apelin和APJ mRNA表达水平与AMPK mRNA表达水平呈正相关关系（R2=0.148, P＜0.05; R2=0.275, P＜0.05）。Western blooting法检测，与对照组比较，Apelin组细胞中Apelin、APJ、IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值明显升高（P＜0.05）, HG组、 HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组细胞中Apelin、APJ、IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值均明显降低（P＜0.05）；与HG组比较，HG+Apelin组细胞中IRS1、IRS2和GLUT4蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AMPK/AMPK比值明显升高（P＜0.05）,HG+Apelin+anti-APJ组细胞中上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。EdU和Transwell小室实验，与对照组比较，Apelin组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数明显升高（P＜0.05）,HG组、HG+Apelin组和HG+Apelin+anti-APJ组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数均明显降低（P＜0.05）；与HG组比较，HG+Apelin组细胞EdU阳性表达率和侵袭细胞数均明显升高（P＜0.05）,HG+Apelin+anti-APJ组上述指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：Apelin和APJ在GDM患者胎盘组织中表达降低，外源性给予Apelin后可改善滋养层细胞IR，并促进HG环境下的滋养层细胞增殖和侵袭能力，其机制可能与Apelin上调AMPK信号通路蛋白表达有关。
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